-
PCR, çoklu PCR, Yerinde PCR, Ters PCR, RT-PCR, qPCR(1)– PCR
PCR, multiple PCR, In situ PCR, Reverse PCR, RT-PCR, qPCR(1)– PCR Çeşitli PCR Ⅰ kavramlarını, adımlarını ve ayrıntılarını sıralayacağız.PCR olarak anılan PCR Polimeraz Zincir Reaksiyonu, spesifik DNA fragmanlarını büyütmek için kullanılan moleküler bir biyolojik teknolojidir.Bir olarak kabul edilebilir ...Devamını oku -
qRT-PCR deney prensibi
RT-qPCR, sıradan PCR teknolojisinden geliştirilmiştir.Geleneksel PCR reaksiyon sistemine floresan kimyasallar (floresan boyalar veya floresan problar) ekler ve farklı lüminesans mekanizmalarına göre PCR tavlama ve uzatma sürecini gerçek zamanlı olarak tespit eder.Floresan tabela...Devamını oku -
RT-PCR deneysel reaksiyon sistemi optimizasyon yöntemi ayrıntılı özeti
Ⅰ.Reaksiyon sisteminin hassasiyetini artırın: 1. Ayrı yüksek kaliteli RNA: Başarılı cDNA sentezi, yüksek kaliteli RNA'dan gelir.Yüksek kaliteli RNA, en azından toplam daha uzun süre sağlamalıdır ve EDTA veya SDS gibi kayıt enzimleri içermeyen inhibitörler içermez.kalite...Devamını oku -
qPCR Deneyleri İçin Makul Ct Değerleri Aralığından Nasıl Emin Olunur?
Ct değeri, floresan kantitatif PCR'nin en önemli sonuç sunum şeklidir.Gen ekspresyon farklılıklarını veya gen kopya sayısını hesaplamak için kullanılır.Öyleyse, makul olarak kabul edilen floresan miktarının Ct değeri nedir?Etkili Ct değeri aralığı nasıl sağlanır?Ct nedir...Devamını oku -
RT-qPCR deneyinizin başarı oranını ikiye katlamak için aşağıdaki ayrıntılara dikkat edin!
RT-qPCR, moleküler biyolojinin temel deneyidir ve herkesin buna aşina olması gerekir.Esas olarak üç adımı içerir: RNA ekstraksiyonu, cDNA'ya ters transkripsiyon ve gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR.Yardım etmiyor, neler oluyor?büyük ihtimalle bir sorun vardır...Devamını oku -
RNA ekstraksiyonu, 260/230 özellikle düşüktür ve pcr çalışmasının ct değeri çok yüksektir.Nasıl çözeceksin?
Düşük A260/A230 oranı genellikle 230nm'de maksimum absorpsiyon dalga boyuna sahip safsızlıklardan kaynaklanır.Bu safsızlıkların neler içerdiğini görelim: Yaygın kirleticiler Absorpsiyon dalga boyu Oran etkisi Protein ~230nm ve 280nm A 260 /A 280 ve A 260 /A'nın eşzamanlı indirgenmesi ...Devamını oku -
Floresan kantitatif PCR (qPCR) – primer tasarımı
qPCR deneylerinde primer tasarımı da çok önemli bir bağlantıdır.Primerlerin uygun olup olmadığı, amplifikasyon veriminin standarda ulaşıp ulaşmadığı, amplifiye edilen ürünlerin spesifik olup olmadığı ve deneysel sonuçların mevcut olup olmadığı ile yakından ilgilidir.Peki nasıl yapılır...Devamını oku -
PCR reaksiyonlarındaki yaygın katkı maddeleri ve işlevleri
Herkesin PCR reaksiyonları yaparken her zaman böyle veya böyle sorunlarla karşılaşacağına inanıyorum, ancak bunların çoğu iki ana sorun olarak sınıflandırılabilir: Gen şablonunun çok az amplifikasyonu (amplifikasyon);Çok fazla hedef olmayan gen amplifikasyonu.Katkı maddelerinin kullanılması yaygın yollardan biridir...Devamını oku -
Dünya çapında pazarlanan 45 gen terapisi ilacının özeti
Genler, özellikleri kontrol eden temel genetik birimlerdir.Bazı virüslerin RNA'dan oluşan genleri dışında, çoğu organizmanın genleri DNA'dan oluşur.Organizmaların çoğu hastalığı, genler ve çevre arasındaki etkileşimden kaynaklanır.Gen terapisi esasen tedavi edebilir ...Devamını oku -
RNA terapisi çağında kimler endüstrinin “yeni sevgilisi” olabilir |Yıllık envanter
Kaynak: WuXi AppTec Son yıllarda, RNA terapisi alanı patlayıcı bir eğilim gösterdi - yalnızca son 5 yılda, 11 RNA terapisi FDA tarafından onaylandı ve bu sayı daha önce onaylanmış RNA terapilerinin toplamını bile aşıyor!Geleneksel terapilerle karşılaştırıldığında, RNA terapisi...Devamını oku -
Nükleik asit çıkarıldı!Peki bu DNA (RNA) hayal ettiğiniz DNA (RNA) mı?
Nükleik asit ekstraksiyonu hakkında ne biliyorsunuz Saflaştırılmış nükleik asidin başlangıcı ve sonu Başlangıçta her şey zordur, saflaştırılmış nükleik asit en sonraki deneyler için moleküler deneylerin başlatılması Başarı veya başarısızlığın çok önemli bir etkisi vardır.İz/ultra iz UV...Devamını oku -
7 dk: 96 oyuklu plaka hücresinden RT-qPCR'ye
7 dakika ne kadar sürer?420 saniye.7 dakikada ne yapabilirim?Bir bardak çaydır, bir şarkı dinlemektir;sınıftan geçmenin sevincidir ama perde açılmadan önceki kaygıdır....Devamını oku