• Facebook
  • Linkedin
  • Youtube

İmmünoglobulinler (Ig) olarak da adlandırılan antikorlar, spesifik olarak antijenlere bağlanan glikoproteinlerdir.
 
Geleneksel antikor preparasyonu, hayvanlara bağışıklık kazandırılarak ve antiserum toplanarak üretilir.Bu nedenle, antiserum genellikle serumdaki diğer ilgisiz antijenlere ve diğer protein bileşenlerine karşı antikorlar içerir.Genel antijen molekülleri çoğunlukla çok sayıda farklı epitop içerir, bu nedenle geleneksel antikorlar ayrıca çok sayıda farklı epitopa karşı antikorların bir karışımıdır.Aynı epitopa yönelik geleneksel serum antikorları bile, farklı B hücresi klonları tarafından üretilen heterojen antikorlardan oluşur.Bu nedenle, geleneksel serum antikorlarına poliklonal antikorlar veya kısaca poliklonal antikorlar da denir.
 
Monoklonal antikor (monoklonal antikor), tek bir B hücresi klonu tarafından üretilen ve yalnızca belirli bir epitopa karşı yönlendirilen oldukça homojen bir antikordur.Genellikle hibridoma teknolojisi ile hazırlanır; hibridoma antikor teknolojisi, hücre füzyon teknolojisine dayalıdır ve spesifik antikorları salgılama kabiliyetine sahip B hücrelerini ve B hücresi hibridomlarına sonsuz büyüme kapasitesine sahip miyelom hücrelerini birleştirir.Bu hibridoma hücresi, bir ana hücrenin özelliklerine sahiptir.Miyelom hücreleri gibi in vitro süresiz ve ölümsüz olarak çoğalabilir ve splenik lenfositler gibi spesifik antikorları sentezleyebilir ve salgılayabilir.Klonlama yoluyla, tek bir hibridoma hücresinden türetilen bir monoklonal çizgi, yani bir hibridoma hücre çizgisi elde edilebilir.Ürettiği antikorlar, aynı antijenik determinant yani monoklonal antikorlara karşı oldukça homojen antikorlardır.
 
Antikorlar, bir veya daha fazla Y-biçimli monomer (yani monoklonal antikorlar veya poliklonal antikorlar) olarak bulunur.Her bir Y-biçimli monomer, iki özdeş ağır zincir ve iki özdeş hafif zincir dahil olmak üzere 4 polipeptit zincirinden oluşur.Hafif zincir ve ağır zincir, moleküler ağırlıklarına göre adlandırılır.Y şeklindeki yapının tepesi, antijen bağlama bölgesi olan değişken bölgedir.(Detai Bio-Monoklonal Antikor Konseptinden Alıntıdır)
 
antikor yapısı
1Ağır zincir
Yunan harfleri α, δ, ε, γ ve μ ile adlandırılan beş tip memeli Ig ağır zinciri vardır.Karşılık gelen antikorlar IgA, IgD, IgE, IgG ve IgM olarak adlandırılır.Farklı ağır zincirler boyut ve bileşim bakımından farklılık gösterir.α ve γ yaklaşık 450 amino asit içerirken μ ve ε yaklaşık 550 amino asit içerir.
Her ağır zincirin iki bölgesi vardır: sabit bölge ve değişken bölge.Aynı tipteki tüm antikorlar aynı sabit bölgeye sahiptir, ancak farklı tipteki antikorlar arasında farklılıklar vardır.Ağır zincirler y, a ve 8'in sabit bölgeleri, esnekliğini artırmak için bir menteşe bölgesi ile, tandem halindeki üç Ig alanından oluşur;ağır zincirlerin μ ve ε sabit bölgeleri 4 Ig alanından oluşur.Farklı B hücreleri tarafından üretilen antikorun ağır zincirinin değişken bölgesi farklıdır ancak aynı B hücresi veya hücre klonu tarafından üretilen antikorun değişken bölgesi aynıdır ve her bir ağır zincirin değişken bölgesi yaklaşık 110 amino asit uzunluğundadır., Ve tek bir Ig alanı oluşturur.
 
Işık zinciri
Memelilerde sadece iki tip hafif zincir vardır: lambda tipi ve kappa tipi.Her hafif zincirin birbirine bağlı iki alanı vardır: bir sabit bölge ve bir değişken bölge.Hafif zincirin uzunluğu yaklaşık 211~217 amino asittir.Her antikorda bulunan iki hafif zincir her zaman aynıdır.Memeliler için, her bir antikordaki hafif zincirin yalnızca bir tipi vardır: kappa veya lambda.Kıkırdaklı balıklar (kıkırdaklı balıklar) ve kemikli balıklar gibi bazı düşük omurgalılarda, iota (iota) tipi gibi diğer hafif zincir türleri de bulunur.
 
Fab ve Fc segmentleri
Fc segmenti, antikorları etiketlemek için doğrudan enzimler veya flüoresan boyalarla birleştirilebilir.ELISA işlemi sırasında antikorun plakaya perçinlendiği kısım olup, aynı zamanda immünopresipitasyon, immünoblotlama ve immünhistokimyada ikinci antikorun tanınıp bağlandığı kısımdır.Antikorlar, papain gibi proteolitik enzimler tarafından iki F(ab) segmentine ve bir Fc segmentine hidrolize edilebilir veya pepsin tarafından menteşe bölgesinden kırılarak bir F(ab)2 segmentine ve bir Fc segmentine hidrolize edilebilir.IgG antikor fragmanları bazen çok faydalıdır.Fc segmentinin olmaması nedeniyle, F(ab) segmenti antijenle çökelmeyecek ve in vivo çalışmalarda immün hücreler tarafından yakalanmayacaktır.Küçük moleküler fragmanlar ve çapraz bağlama fonksiyonunun olmaması nedeniyle (Fc segmentinin olmamasından dolayı), Fab segmenti genellikle fonksiyonel çalışmalarda radyo etiketleme için kullanılır ve Fc segmenti, esasen histokimyasal boyamada bir bloke edici ajan olarak kullanılır.
 
Değişken ve sabit bölgeler
Değişken bölge (V bölgesi), H zincirinin N-terminaline yakın 1/5 veya 1/4'ünde (yaklaşık 118 amino asit kalıntısı içerir) ve L zincirinin N-terminaline yakın 1/2'sinde (yaklaşık 108-111 amino asit kalıntısı içerir) bulunur.Her V bölgesi, zincir içi disülfit bağlarından oluşan bir peptit halkasına sahiptir ve her bir peptit halkası yaklaşık 67 ila 75 amino asit kalıntısı içerir.V bölgesindeki amino asitlerin bileşimi ve düzenlenmesi, antikorun antijen bağlama özgüllüğünü belirler.V bölgesindeki amino asitlerin sürekli değişen türleri ve dizilimleri nedeniyle, farklı bağlayıcı antijen özgünlüklerine sahip birçok türde antikor oluşturulabilir.L zincirinin ve H zincirinin V bölgeleri sırasıyla VL ve VH olarak adlandırılır.VL ve VH'de, bazı yerel bölgelerin amino asit bileşimi ve dizisi daha yüksek derecede varyasyona sahiptir.Bu bölgelere hiperdeğişken bölgeler (HVR) denir.V bölgesindeki amino asit bileşimi ve HVR olmayan parçaların düzenlenmesi, çerçeve bölgesi olarak adlandırılan nispeten muhafazakardır.VL'de genellikle sırasıyla 24 ila 34 ve 89 ila 97 amino asit kalıntılarında bulunan üç hiperdeğişken bölge vardır.VL ve VH'nin üç HVR'si sırasıyla HVR1, HVR2 ve HVR3 olarak adlandırılır.X-ışını kristal kırınımının araştırılması ve analizi, hiperdeğişken bölgenin gerçekten de antikor antijeninin bağlandığı yer olduğunu kanıtladı, bu nedenle buna tamamlayıcılık belirleyici bölge (CDR) denir.VL ve VH'nin HVR1, HVR2 ve HVR3'ü sırasıyla CDR1, CDR2 ve CDR3 olarak adlandırılabilir.Genel olarak, CDR3 daha yüksek derecede hiperdeğişkenliğe sahiptir.Hiperdeğişken bölge aynı zamanda Ig moleküllerinin idiyotipik determinantlarının bulunduğu ana bölgedir.Çoğu durumda, H zinciri antijene bağlanmada daha önemli bir rol oynar.
2Sabit bölge (C bölgesi)H zincirinin 3/4 veya 4/5'inde (yaklaşık olarak amino asit 119'dan C terminaline kadar) C terminalinin yakınında ve 1/2'sinde (yaklaşık 105 amino asit kalıntısı içerir) L zincirinin C terminalinin yakınında bulunur.H zincirinin her fonksiyonel bölgesi, yaklaşık 110 amino asit kalıntısı içerir ve disülfid bağları ile bağlanan 50-60 amino asit kalıntısından oluşan bir peptit halkası içerir.Bu bölgenin amino asit bileşimi ve düzeni, aynı hayvan Ig izotip L zincirinde ve aynı tip H zincirinde nispeten sabittir.Aynısı, yalnızca karşılık gelen antijene spesifik olarak bağlanabilir, ancak C bölgesinin yapısı aynıdır, yani aynı antijeniteye sahiptir.At anti-insan IgG sekonder antikoru (veya anti-antikoru) iki farklı ekzotoksinlere karşı bir antikor kombinasyonu (IgG) ile kombine edilebilir.Bu, ikincil antikorların hazırlanması ve floresein, izotoplar, enzimler ve diğer etiketli antikorların uygulanması için önemli bir temeldir.
 
 
İlgili ürünler:
Hücre Doğrudan RT-qPCR kiti

 

 


Gönderim zamanı: 30 Eylül-2021