• Facebook
  • Linkedin
  • Youtube
sayfa_banner

Bitki Toplam RNA İzolasyon Kiti Artı Polisakkaritler ve Polifenoller Açısından Zengin Bitkiler İçin Toplam RNA Saflaştırma Kiti

Takım Açıklaması:

 

Ref.RE-05021/05022/05024

 

Yüksek polisakkarit ve polifenol bileşenleri içeren genel bitki numunelerinden toplam RNA'nın saflaştırılması için.

Yüksek polisakkarit ve polifenol içeriğine sahip bitki örneklerinden yüksek kaliteli toplam RNA'yı hızla çıkarın.

DNA Temizleme Sütunu Kullanarak RNaz İçermez

Basit—tüm işlemler oda sıcaklığında tamamlanır

Hızlı—işlem 30 dakikada tamamlanabilir

Güvenli—organik reaktif kullanılmaz foregene gücü


Ürün ayrıntısı

Ürün etiketleri

SSS

KAYNAKLARI İNDİR

Özellikler

50 Hazırlık, 200 Hazırlık

Kit, yüksek polisakkarit veya polifenol içeriğine sahip çeşitli bitki dokularından yüksek saflıkta ve yüksek kaliteli toplam RNA'yı verimli bir şekilde çıkarabilen Foregene tarafından geliştirilen spin kolonu ve formülü kullanır.Süpernatandan ve doku lizatından genomik DNA'yı kolayca çıkarabilen DNA-Temizleme sütununu sağlar.Yalnızca RNA sütunu, RNA'yı etkili bir şekilde bağlayabilir.Kit, aynı anda çok sayıda örneği işleyebilir.

Tüm sistem RNaz içermez, bu nedenle saflaştırılmış RNA bozulmaz.Tampon PRW1 ve Tampon PRW2, elde edilen RNA'nın protein, DNA, iyonlar ve organik bileşikler tarafından kontamine olmamasını sağlayabilir.

Kit bileşenleri

Tampon PSL1, Tampon PS, Tampon PSL2

Tampon PRW1, Tampon PRW2

RNaz İçermeyen ddH2O, DNA Temizleme Kolonu

Yalnızca RNA Sütunu

Özellikler ve avantajlar

■ Tüm süreç boyunca oda sıcaklığında (15-25°C), buz banyosu ve düşük sıcaklıkta santrifüjleme olmadan çalıştırma.
■ RNaz İçermeyen eksiksiz kit, RNA bozulması konusunda endişelenmenize gerek yok.
■ Polisakkaritler ve polifenollerin bitki örneklerinden RNA'nın saflaştırılması için özellikle uygundur.
■ DNA Temizleme Sütunu spesifik olarak DNA'ya bağlanır, böylece kit, DNaz eklemeden genomik DNA kontaminasyonunu giderebilir.
■ Yüksek RNA verimi: Yalnızca RNA Sütunu ve benzersiz formül, RNA'yı verimli bir şekilde saflaştırabilir.
■ Yüksek hız: çalıştırması kolaydır ve 30 dakikada tamamlanabilir.
■ Güvenlik: organik reaktif gerekmez.
■ Yüksek kalite: Saflaştırılmış RNA fragmanları yüksek saflıkta olup, protein ve diğer safsızlıklar içermez ve çeşitli aşağı yönlü deneysel uygulamaları karşılayabilir.

Ürün parametreleri

■ Aşağı akış uygulamaları: birinci iplikçik cDNA sentezi, RT-PCR, moleküler klonlama, Northern Blot, vb.
■ Örnek: Polisakkaritlerin ve polifenollerin taze veya donmuş bitki dokuları
■ Dozaj: 50mg bitki dokusu
■ Saflaştırma sütununun maksimum RNA bağlama kapasitesi: 80 μg
■ Elüsyon hacmi: 50-200 μl

Kit uygulaması

Yüksek polisakkarit ve polifenol içeriğine sahip taze veya dondurulmuş bitki doku örneklerinden (özellikle taze bitki yaprak dokusu) toplam RNA'nın ekstraksiyonu ve saflaştırılması için uygundur.

iş akışı

bitki toplam RNA-basit iş akışı

Diyagram

Bitki Toplam RNA İzolasyon Kiti Plus 6

Plant Total RNA Isolation Kit Plus, 50 mg taze polisakkarit ve polifenol yaprağını işledi ve %5 saflaştırılmış RNA, elektroforez ile test edildi.
1: Muz
2: Ginkgo
3: Pamuk
4: Nar

Depolama ve Raf ömrü

Bu kit kuru koşullarda oda sıcaklığında (15-25°C) 24 ay saklanabilir;daha uzun süre saklanması gerekiyorsa 2–8°C'de saklanabilir.
Tampon PSL1, β-merkaptoetanol eklendikten sonra 1 ay boyunca 4°C'ye yerleştirilebilir (deneyle aynı zamanda eklenmesi önerilir).


  • Öncesi:
  • Sonraki:

  • Sütun takılı

    Kolon tıkalı olduktan sonra RNA verimi azalır hatta RNA'yı saflaştırmak imkansızdır ve elde edilen RNA kütlesi düşüktür.

    Ortak neden analizi:

    1. Numune araları tam değildir.

    Numune kırılması, RNA verimini ve kalitesini etkilerken, DNA TEMİZLEME KOLONUNUN tamamen bloke edilmesine neden olmaz.Numuneleri kırdığınızda yeterli sıvı nitrojende hızlı öğütme işlemi yapmanızı öneririz. Numuneyi hücre duvarı, hücre zarı ve diğer dokuları ezmeye çalışın.Poliol polisakkaritlerin bitki numuneleri için, Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS kullanmanızı öneririz.

    2. Ayrılmış numune süpernatanını DNA Temizleme Sütunu ile emerken, olası hücre parçalanmış çökelti solunabilir.

    Alınan hücre parçalanmış çökeltiler, RNA adsorpsiyon işlemi gerçekleştirildiğinde bloke edilecek YALNIZCA RNA Sütununa neden olacaktır (6. adıma bakın).Hücre kalıntılarının emilmesini önlemek için bu süpernatantı emerken dikkatli olmanızı öneririz.

    3. Numune başlangıç ​​miktarı çok fazla.

    Aşırı örnek kullanımı, Tampon PSL1 tarafından tamamlanmamış örnek parçalanmasına veya eksik hücre parçalanmasına yol açarak saflaştırma sırasında saflaştırma kolonunun tıkanmasına neden olur.Bitki Toplam RNA İzolasyon Kiti Her bir saflaştırılmış çalışma numunesi 50 mg'dır.Poliol polisakkaritlerin bitki numuneleri için, Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS'ı denemenizi öneririz.

    4. Santrifüjün sıcaklığı çok düşük.

    Tüm RNA izolasyonu ve saflaştırma işlemi oda sıcaklığında (20-25°C), numune dokusunun sıvı nitrojen tarafından kırılması dışında. Bazı kriyojenik santrifüjlerin sıcaklığı 20°C'nin altındadır., bu da DNA Temizleme Sütunu ve/veya Yalnızca RNA Sütununun tıkanmasına neden olabilir.Bu olursa, santrifüj sıcaklığını 20-25 olarak ayarlayın., Velizis karışımının ve/veya etanol eklenmiş yüzer maddenin önceden 37°C'ye ısıtıldığından emin olun°C.

    Ekstrakte RNA yok veya RNA verimi düşük

    Genellikle geri kazanım verimliliğini etkileyen birçok faktör vardır, örneğin: numune RNA içeriği, çalıştırma yöntemi, elüsyon hacmi, vb.

    Yaygın nedenlerin analizi aşağıdaki gibidir:

    1.İşlem sırasında bir buz banyosu veya düşük sıcaklıkta (4°C) santrifüjleme yapılmıştır.

    Öneri: Oda sıcaklığında çalıştırın (15-25°C) tüm süreçte buz banyosu ve düşük sıcaklıkta santrifüjleme yapmayın.

    2. Numunenin uygun olmayan şekilde muhafaza edilmesi veya numunenin uzun süreli muhafaza edilmesi nedeniyle RNA bozulmuştur.

    Öneri: Taze toplanmış numuneler, sıvı nitrojen içinde hızlı bir şekilde dondurulmalı ve daha sonra -80°C'de uzun süre saklanmalı, numunelerin tekrar tekrar dondurulup çözülmesinden kaçınılmalıdır;veya numuneleri hemen RNA stabilizatörü RNAsonraki çözeltiye (hayvan numuneleri) batırın.

    3. Yetersiz numune parçalanması ve parçalanması, saflaştırma sütununun tıkanmasına neden olur.

    Öneri: Dokuyu öğütürken, lütfen dokunun yeterince öğütülmüş olduğundan emin olun ve hızlı bir şekilde önceden hazırlanmış Tampon PSL1'e aktarın (doğru oranda β-ME eklendiğini onaylayın, prosedürün 1. adımına bakın).

    4. Eluent yanlış eklendi.

    Öneri: RNaz İçermeyen ddH2O'nun saflaştırma kolonu zarının ortasına damlatıldığından emin olun.

    5. Doğru hacimde mutlak etanol PSL2 Tamponuna veya Tampon PRW2'ye eklenmedi.

    Öneri: Lütfen talimatları izleyin, Buffer PSL2 ve Buffer PRW2'ye doğru hacimde mutlak etanol ekleyin ve kit kullanılmadan önce iyice karıştırın.

    6. Doku örneği miktarı uygun değil.

    Öneri: 500 μl Buffer PSL1 başına 50 mg doku kullanın.Çok fazla doku kullanılması, ekstrakte edilen RNA miktarını azaltacak ve elde edilen RNA'nın saflığı da azalacaktır.İlk numune dozunun, RNA ekstraksiyon işlemi başına 50 mg'ı geçmemesini şiddetle tavsiye ederiz.

    7. Uygun olmayan elüsyon hacmi veya eksik elüsyon.

    Öneri: Saflaştırma kolonunun elüent hacmi 50-200 µl'dir;elüsyon etkisi tatmin edici değilse, 5-10 dakika gibi önceden ısıtılmış RNazsız ddH2O eklendikten sonra sürenin oda sıcaklığında uzatılması önerilir.

    8. Saflaştırma kolonunda BufferPRW2 ile yıkandıktan sonra etanol kalıntısı bulunur.

    Öneri: Boş tüp 1 dakika santrifüjlenirse ve PRW2 Tamponunda yıkandıktan sonra hala etanol kalırsa, boş tüp santrifüjleme süresini 2 dakikaya çıkarabilirsiniz veya kalan etanolü tamamen çıkarmak için saflaştırma kolonunu 5 dakika oda sıcaklığında tutabilirsiniz.

    9.Kit yanlış kullanılmış.

    Öneri: Polifenolik polisakkaritlerin bitki numuneleri için, Bitki Toplam RNA İzolasyon Kiti gibi yaygın kitlerin kullanılması ideal RNA numunelerini elde edemeyebilir.Polifenolik polisakkarit bitki numuneleri için özel olarak tasarlanmış Plant Total RNA IsolationKit Plus kullanmanızı tavsiye ederiz.Polifenol ve polisakkarit bitki örneklerinden RNA ekstraksiyonu için özel olarak geliştirilmiş bir kit.

    OD260/OD280 değeri düşük

    ddH2O ile RNA elüsyonu ve spektrofotometre okumaları için kullanılması, düşük OD260/OD280 değerleri ile sonuçlanır.Nispeten doğru OD260/OD280 değerleri elde etmek için 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (RNA'yı elute etmek için RNaz İçermeyen ddH2O yerine) kullanmanızı öneririz, bkz. "RNA Konsantrasyon ve Saflaştırma Testleri" sayfa 19.

    Saflaştırılmış RNA bozulur

    Saflaştırılmış RNA'nın kalitesi, örneğin korunması, RNaz kontaminasyonu ve manipülasyon gibi faktörlerle ilişkilidir.

    Yaygın nedenlerin analizi:

    1.Doku örnekleri toplandıktan sonra zamanında saklanmadı.

    Öneri: Doku örnekleri toplandıktan sonra zamanında kullanılmayacaksa, lütfen bunları hemen düşük sıcaklıkta sıvı nitrojende saklayın veya sıvı nitrojende hızlı dondurduktan sonra uzun süreli saklama için -80°C'ye aktarın veya numuneleri hemen RNA stabilizatör RNAlater solüsyonuna (hayvan numuneleri) daldırın.RNA ekstraksiyonu için taze toplanmış doku örneklerini kullanmayı deneyin.

    2. Doku örneklerinin tekrar tekrar dondurulması ve çözülmesi.

    Öneri: Doku örneklerini saklarken, korumak için küçük parçalara ayırmak ve örneklerin tekrar tekrar dondurulup çözülmesinden kaynaklanan RNA bozulmasını önlemek için bunları kullanırken bir kısmını çıkarmak en iyisidir.

    3.RNase ameliyathanede tanıtılan veya giyilmeyen tek kullanımlık eldiven, maske vb.

    Öneri: RNA ekstraksiyon deneyleri en iyi şekilde ayrı RNA işlemlerinde gerçekleştirilir ve deneyden önce laboratuvar masası temizlenmeli ve RNaz'ın girmesinden kaynaklanan RNA bozunmasını büyük ölçüde önlemek için deney sırasında tek kullanımlık eldivenler ve maskeler takılmalıdır.

    4. Reaktif, kullanım sırasında RNase ile kontamine olur.

    Öneri: İlgili deneyler için yeni bir dizi bitki toplam RNA ekstraksiyon kitleri ile değiştirin.

    5.RNA manipülasyonu için kullanılan santrifüj tüpleri ve pipet uçları RNaz ile kirlenmiştir.

    Öneri: RNA ekstraksiyonunda kullanılan santrifüj tüplerinin, pipet uçlarının, pipetlerin vb.

    Kullanım kılavuzları:

    Bitki Total RNA İzolasyon Kiti Plus Kullanım Kılavuzu

     

    Mesajınızı buraya yazın ve bize gönderin.