Viral DNA&RNA İzolasyon Kiti Viral DNA ve RNA Ekstraksiyonu Saflaştırma Hazırlama Kitleri
Özellikler
50 Hazırlık, 200 Hazırlık
Viral RNA Nükleik Asit Saflaştırma Ekstraksiyon İzolasyon Kiti, plazma, serum, hücresiz vücut sıvısı ve hücre kültürü süpernatanı gibi numunelerden yüksek saflıkta ve yüksek kaliteli viral RNA'yı verimli bir şekilde çıkarabilen Foregene tarafından geliştirilen spin kolonu ve formülü kullanır.Kit, numunelerden küçük miktarlarda RNA'yı kolayca yakalayabilen Doğrusal Akrilamid'i özel olarak ekler.Yalnızca RNA Sütunu, RNA'yı verimli bir şekilde bağlayabilir.Kit, aynı anda çok sayıda örneği işleyebilir.
Kitin tamamı RNaz içermez, bu nedenle saflaştırılmış RNA bozulmaz.Tampon viRW1 ve Tampon viRW2, elde edilen viral nükleik asidin protein, nükleaz veya diğer safsızlıklardan arınmış olmasını sağlayabilir ve bunlar doğrudan sonraki moleküler biyoloji deneyleri için kullanılabilir.
Kit bileşenleri
| Doğrusal Akrilamid |
| Tampon DRL'si |
| Tampon RW1, Tampon RW2 |
| RNaz İçermeyen ddH2O |
| DNA/RNA Sütunu |
| Talimatlar |
Özellikler ve avantajlar
■ Tüm süreç boyunca oda sıcaklığında (15-25°C), buz banyosu ve düşük sıcaklıkta santrifüjleme olmadan çalıştırma.
■ RNaz İçermeyen eksiksiz kit, RNA bozulması konusunda endişelenmenize gerek yok.
■ Yüksek nükleik asit verimi: Yalnızca DNA/RNA Sütunu ve benzersiz formül, DNA ve RNA'yı verimli bir şekilde saflaştırabilir.
■ Büyük numune işleme kapasitesi: her seferinde 200μl'ye kadar numune işlenebilir.
■ Yüksek hız: çalıştırması kolay ve 20 dakika içinde tamamlanabilir.
■ Güvenlik: organik reaktif gerekmez.
■ Yüksek kalite: Saflaştırılmış RNA fragmanları yüksek saflıkta olup, protein ve diğer safsızlıklar içermez ve çeşitli aşağı yönlü deneysel uygulamaları karşılayabilir.
Kit uygulaması
Plazma, serum, hücresiz vücut sıvısı ve hücre kültürü süpernatanı gibi numunelerde viral nükleik asidin ekstraksiyonu ve saflaştırılması için uygundur.
iş akışı
Diyagram
Depolama ve Raf ömrü
■ Bu kit kuru koşullar altında oda sıcaklığında (15-25°C) 24 ay saklanabilir;daha uzun süre saklanması gerekiyorsa 2–8°C'de saklanabilir.
■ Doğrusal Akrilamid solüsyonu oda sıcaklığında 7 gün saklanabilir;Kiti teslim aldıktan sonra lütfen çıkarın ve -20°C'de saklayın.
■ Buffer DRL'ye Doğrusal Akrilamid eklendikten sonra 2-8°C'de 48 saate kadar saklanabilir.Lütfen hazır çözümü kullanın.
Problem Analizi Rehberi
Aşağıda, deneylerinize yardımcı olması ümidiyle viral DNA/RNA ekstraksiyonunda karşılaşılabilecek sorunların bir analizi yer almaktadır.Ayrıca, çalıştırma talimatları ve sorun analizi dışındaki diğer deneysel veya teknik sorunlar için, size yardımcı olacak özel teknik desteğimiz bulunmaktadır.Herhangi bir ihtiyacınız varsa, lütfen bizimle iletişime geçin: 028-83360257 veya E-posta:
Tech@foregene.com.
Nükleik asit ekstraksiyonu yok veya düşük nükleik asit verimi
Genellikle geri kazanım verimliliğini etkileyen pek çok faktör vardır, örneğin: numune nükleik asit içeriği, çalıştırma yöntemi, elüsyon hacmi, vs.
Yaygın nedenlerin analizi:
1. Prosedür sırasında bir buz banyosu veya düşük sıcaklıkta (4°C) santrifüjleme yapıldı.
Öneri: Tüm süreç boyunca oda sıcaklığında (15-25°C) çalıştırın, buz banyosu ve düşük sıcaklıkta santrifüjleme yapmayın.
2. Numune uygun olmayan şekilde saklanmış veya numune çok uzun süre saklanmış.
Öneri: Numuneleri -80°C'de saklayın ve tekrar tekrar dondurma ve çözme işleminden kaçının;nükleik asit ekstraksiyonu için yeni toplanmış örnekleri kullanmayı deneyin.
3. Yetersiz numune parçalanması.
Öneri: Lütfen numune ve lizis çalışma solüsyonunun iyice karıştırıldığından ve oda sıcaklığında (15-25°C) 10 dakika inkübe edildiğinden emin olun.
4. Eluentin yanlış eklenmesi.
Öneri: RNaz İçermeyen ddH2O'nun saflaştırma kolonu zarının ortasına damla damla eklendiğinden emin olun ve saflaştırma kolonu halkasına düşürmeyin.
5. Mutlak etanolün doğru hacmi Tampon RW2'ye eklenmedi.
Öneri: Lütfen talimatları izleyin, Buffer RW2'ye doğru hacimde mutlak etanol ekleyin ve kiti kullanmadan önce iyice karıştırın.
6. Uygun olmayan numune hacmi.
Öneri: Her 500 µl Tampon DRL için 200 µl numune işlenir.Aşırı numune işleme, daha düşük nükleik asit ekstraksiyon verimi ile sonuçlanacaktır.
7. Uygun olmayan elüsyon hacmi veya eksik elüsyon.
Öneri: Saflaştırma kolonunun eluent hacmi 30-50μl'dir;elüsyon etkisi tatmin edici değilse, 5-10 dakika gibi önceden ısıtılmış RNazsız ddH2O eklendikten sonra sürenin oda sıcaklığında uzatılması önerilir.
8. Tampon RW2 ile yıkandıktan sonra kolonda etanol kalır.
Öneri: Tampon RW2 ile 2 dakika santrifüjlemeden sonra etanol kalırsa, kalıntı etanolü tamamen çıkarmak için kolon santrifüjlemeden sonra 5 dakika oda sıcaklığında tutulabilir.
Saflaştırılmış nükleik asit bozulur
Saflaştırılmış nükleik asidin kalitesi örneğin korunması, RNaz kontaminasyonu, çalışması ve diğer faktörlerle ilişkilidir.Yaygın nedenlerin analizi:
1. Toplanan numuneler zamanında saklanmamıştır.
Öneri: Numune alındıktan sonra zamanında kullanılmazsa, lütfen hemen -80°C'de düşük sıcaklıkta saklayın.RNA ekstraksiyonu için yeni toplanmış örnekleri kullanmayı deneyin.
2. Numuneleri toplayın ve tekrar tekrar dondurun ve çözün.
Öneri: Numunelerin toplanması ve saklanması sırasında dondurma ve çözme işleminden kaçının (bir defadan fazla değil), aksi takdirde nükleik asit verimi azalır.
3. Ameliyathaneye RNaz konulur veya tek kullanımlık eldiven, maske vb. giyilmez.
Öneri: RNA ekstraksiyon deneyleri en iyi şekilde ayrı bir RNA ameliyathanesinde yapılır ve deneyden önce laboratuvar masası temizlenmelidir.
RNase'in eklenmesinin neden olduğu RNA bozulmasını büyük ölçüde önlemek için deney sırasında tek kullanımlık eldivenler ve maskeler giyin.
4. Reaktif, kullanım sırasında RNase ile kontamine olmuştur.
Öneri: İlgili deneyler için yeni bir Viral DNA/RNA İzolasyon Kiti ile değiştirin.
5. RNA manipülasyonu için kullanılan santrifüj tüpleri ve pipet uçları RNaz ile kirlenmiştir.
Öneri: RNA ekstraksiyonu için kullanılan santrifüj tüplerinin, pipet uçlarının, pipetlerin vb. hiçbirinin RNaz İçermediğinden emin olun.
Saflaştırılmış nükleik asit, sonraki deneyleri etkiler
Saflaştırma kolonu tarafından saflaştırılan DNA ve RNA, eğer tuz iyonu ve protein içeriği çok yüksekse, bu aşağıdaki deneyleri etkiler: PCR amplifikasyonu, ters transkripsiyon, vb.
1. Ayrılan DNA ve RNA artık tuz iyonlarına sahiptir.
Öneri: Tampon RW2'ye doğru hacimde mutlak etanol eklendiğinden emin olun ve saflaştırma kolonunu çalıştırma talimatlarında belirtilen santrifüjleme hızında iki kez yıkayın;Tuz iyonu kontaminasyonunu en aza indirmek için santrifüjleme yapın.
2. Ayrılan DNA ve RNA etanol kalıntılarına sahiptir.
Öneri: Tampon RW2 ile yıkamayı onayladıktan sonra, çalıştırma talimatlarındaki santrifüjleme hızında boş tüp santrifüjleme yapın;hala etanol kalıntısı varsa, boş tüpü santrifüj edebilir ve ardından etanol kalıntısını büyük ölçüde gidermek için oda sıcaklığında 5 dakika bekletebilirsiniz.
Kullanım kılavuzları:
Viral DNA&RNA İzolasyon Kiti Kullanım Kılavuzu
