Nükleik asit ekstraksiyonu, moleküler biyoloji deneyleri için giriş niteliğinde bir beceridir.Bu beceride ustalaşıp ustalaşıp kullanamayacağı, daha sonraki deneycilerin deneysel ustalara yükseltmeleri için bir ön koşul haline geldi.
Farklı araştırma materyallerine göre, deneyciler esas olarak aşağıdaki üç türe ayrılır:
Hayvan majör, Bitki majör, Mikrobiyoloji majör
Her tür deneyci, belirli örnekler için bir dizi özel beceri geliştirmek üzere kopyaları kopyalamaya devam edecektir.
Bugün, editör, deneycilere zindanda bulunmayan bazı ekipman ve aksesuarlar getirmek istiyor.Onlarla, her yöne hızlı bir şekilde yükseltme yapabilirsiniz.Deneysel bir tanrı olmak bir rüya değil.
Bu sayı, bitki uzmanı deneyciler içindir (diğer mesleklerden deneyciler de bundan öğrenebilirler~).
Deneycilerin her neslinin, önceki nesillerden nesillere aktarılan klasik bitki nükleik asit ekstraksiyon yöntemlerini duymuş olacağına inanıyorum.Bitki özütleme endüstrisindeki üç büyük isim.
Büyük adamlar mükemmel olsalar da, yine de bazı kaçınılmaz eksiklikleri var.
TRIzol yöntemi
Genellikle çıkarmak için kullanılır
RNA
●Zehirli ve kullanışsız
●İçeren genom kontaminasyonu
CTAB yöntemi
Genellikle çıkarmak için kullanılır
genetik şifreDNA
●Zaman alıcı
●CTAB'yi yıkayarak çıkarmak tuzdan daha zordur, az miktarda kalıntı enzim aktivitesi üzerinde çok büyük bir etkiye sahip olacaktır.
SDS yöntemi
Genellikle çıkarmak için kullanılır
plazmit
●Yüksek polisakkarit içeriğine sahip bitkiler için uygun değildir.
●Protein kontaminasyonu
İki kat hızlı güncelleme yinelemelerine sahip bu modern toplumda, geleneksel çalışma yöntemleri artık deney yapanların ihtiyaçlarını karşılayamıyor ve ekipman yükseltmeleri çok yakın.
Foregene Nükleik Asit Ekstraksiyon Kiti onlarca deneyci tarafından N kez test edilmiştir.Kullanımı kolaydır, herhangi bir toksik reaktif kullanmaz ve herhangi bir enzim eklemez.Elde edilen nükleik asit, mükemmel deneycilerin günlük ekstraksiyon işlemi için gerekli olan yüksek saflığa sahiptir.
Foregene RNA İzolasyon kiti
Burada deneycilere gizli bir operasyon tekniğini de açıklayacağım, o da bitki tipine göre uygun ekstraksiyon yöntemini seçmektir (bitki tipini belirleme yöntemi yazının sonundadır!) çünkü bazı bitki polisakkaritleri ve polifenolleri yüksek içeriklidir ve geleneksel yöntemler öldürücüdür.Kontrol etmek için yeterli değil.
Şey, böyle...
TRIzol yöntemi, muz yaprakları, ginkgo yaprakları ve pamuk yaprakları gibi yüksek düzeyde polisakkaritler ve polifenoller içeren numunelerin altına doğrudan diz çöktü.
Bu amaçla Foregene, deneyciler için iki etkili araç geliştirmiştir.Düşük polisakkarit ve polifenol içeriği ve yüksek polisakkarit ve polifenol içeriğine sahip bitki RNA ekstraksiyon kiti, düşmanları hedefli bir şekilde öldürebilir, böylece deneyi yapanlar artık farklı bitkilerden korkmazlar.Sadece ekipmanı doğrudan değiştirin!
Ekstraksiyon yöntemini yükseltme ihtiyacına ek olarak, numune ön işleme işlemlerinin de yükseltilmesi gerekir.
Bitki örneklerinin özel yapıları nedeniyle, bazı bitkilerin kökleri ve daha sert gövdelerinin öğütülmesi ve eşit şekilde ezilmesi daha zordur.
Öğütme endüstrisinde, insanların yaklaşık %80'i öğütme için sıvı nitrojen kullanırken, %20'den azı elektrikli öğütme ve öğütme bilyesi salınımı kullanıyor.
Sıvı nitrojen öğütme ucuz ve kullanımı kolay olmasına rağmen, her seferinde ve çabayla öğütmek için büyük bir numune talebi olan deneyciler için bir kabustur!Harç temizlenmezse numuneler arasında çapraz kontaminasyona neden olur.
Elektrikli öğütmenin etkisi kişiden kişiye değişir ve deneyi yapanların çalışma alışkanlıkları nükleik asidin bütünlüğü üzerinde daha büyük bir etkiye sahip olacaktır ve gerekirse düşük sıcaklıkta çalışma gerekir.
bu nedenle, taşlama bilyesi salınımı, mevcut basit ve etkili taşlama ekipmanı olarak kabul edilebilir.
Yaygın salınım modları, dikey salınım, yatay ileri geri salınım ve üç boyutlu (yatay salınım) içerir.Bununla birlikte, Foregene'nin doku kırıcısı mevcut modeli kırar ve öğütmeyi daha üniform hale getirmek için yeni bir 4D salınım yöntemini benimser.
Kullanımı kolay, çeşitli numune gereksinimlerini karşılayın
Eşsiz 4D kırma teknolojisi, kırma verimliliği %20 arttırılmıştır
Numune tamamen kapalıdır, çapraz bulaşma olmaz
Sessiz, ≤56 desibel
Deneyin sonuçlarını bir dalga ile karşılaştırın~
Test örneği: 50 mg buğday yaprağı (düşük polisakkarit ve polifenol içeriği)
Nükleik asit tipini çıkarın: RNA
Nokta miktarı: 5μl
Kullanılan ekstraksiyon kiti Foregene Plant Total RNA Extraction Kit'tir (RE-05011)
Veriler ve elektroforez grafiği karşılaştırıldığında, makine öğütmesinden sonra ekstrakte edilen RNA'nın konsantrasyonunun ve saflığının sıvı nitrojen öğütmesinden daha yüksek olduğu görülebilir.Aynı zamanda, makine öğütme numuneyi daha eksiksiz kırabildiğinden, küçük RNA daha iyi ekstrakte edilebilir ve RNA'nın bütünlüğü korunabilir.
Test örneği: 50 mg ginkgo yaprağı (yüksek polisakkarit ve polifenol içeriği)
Nükleik asit tipini çıkarın: RNA
Nokta miktarı: 5μl
Foregene Polisakkarit Polifenol Bitki Toplam RNA Ekstraksiyon Kitinin (RE-05021) Kullanılması
Yüksek polisakkarit ve polifenol içeriğine sahip bu numune grubuna bir göz atın.Etkisi daha da belirgindir.Aynı saflıkta, makine öğütme RNA'sının konsantrasyonu, sıvı nitrojen öğütmenin yaklaşık 5 katıdır ve küçük RNA hala hafifçe görülebilir~
Yukarıdaki ekipmanların hiçbirinin yeterince hızlı olmadığını düşünüyorsanız, editörün en iyi ekipmanı bulması gerekir!
Bitki Doğrudan PCR serisi
Bu ekipmanın benzersiz özelliği, bitki yapraklarının veya tohumlarının öğütülmesine ve kırılmasına gerek olmaması ve parçalanma için doğrudan EP tüpüne atılması ve elde edilen parçalama karışımının PCR reaksiyonu için bir şablon olarak kullanılabilmesidir.Bir adım daha hızlı olmak kadar basit!Aynı zamanda, Foregene Plants'in doğrudan PCR serisi, UNG anti-kirlilik sistemi ile donatılmıştır, böylece deneyi yapanlar artık laboratuvarda aerosol kirliliği konusunda endişelenmez ve deneyi kolayca alabilirler.
Yargı ipuçları:
Polisakkarit polifenol bitkisi olup olmadığına nasıl karar verilir?
Yaklaşık 20 mg doku bloğu alın ve temiz bir 1,5 ml'lik santrifüj tüpüne koyun, 200 ul 200 mM NaOH solüsyonu ekleyin, 10 dakika 95°C'ye yerleştirin, parçalanmadan sonra renk değişimini gözlemleyin
1. Lizatın rengi yeşil veya açık sarı ise doku polifenol içeriği düşük demektir ve Foregene Plant serisinin kullanılması tavsiye edilir.
2. Lizat kahverengimsi sarı veya kahverengimsi kırmızı ise doku polifenol içeriği yüksek demektir ve Foregene Polisakkarit Polifenol Bitki Plus Serisi kullanılması önerilir.
Gönderim zamanı: 20-20-2021
