PCR'nin doğuşu
PCR (Polimeraz Zincir Reaksiyonu)
Polimeraz zincir reaksiyonunun icadından bu yana 30 yıldan fazla zaman geçti.30 yılı aşkın bir süredir, dünya çapında çok sayıda bilim insanının eklemeye ve geliştirmeye devam etmesinden sonra, PCR teknolojisi, tüm Yaşam Bilimleri alanında en yaygın ve sık kullanılan ve en önemli temel araştırma yöntemi haline geldi.
Geleneksel PCR teknolojisinin geniş uygulama alanı temelinde geliştirilen TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR vb. gibi yeni ortaya çıkan Digital PCR (dijital PCR), bilimsel araştırmacıların çoğunluğunun araştırma yöntemlerini büyük ölçüde zenginleştirmiş ve modern Yaşam Bilimlerinin, özellikle moleküler biyolojinin gelişim sürecini büyük ölçüde hızlandırmış, insanlığın yaşamı ve doğasının bir bütün olarak incelenmesine büyük katkılar sağlamıştır.
Geleneksel PCR teknolojisinin kusurları
Karmaşık nükleik asit ayrımı veçıkarma:
★ Geleneksel PCR teknolojisi: gerekli
★ PCR'den türetilmiş teknoloji: gerekli
★ DNA ve RNA örnekleri: büyük farklılıklar, zor operasyon gereksinimleri
★ Vücut tehlikeleri: toksik reaktifler vücuda zarar verir
Geleneksel PCR teknolojisi ve türev teknolojisi, bir ön koşula sahiptir - nükleik asit ayırma ve saflaştırma
Herhangi bir biyolojik numunenin, PCR teknolojisinin gereksinimlerini karşılayan nükleik asit numuneleri elde etmek için bir dizi karmaşık ve zahmetli numune işleme sürecinden geçmesi gerekir.
DNA ve RNA'nın ayrılması ve ekstraksiyonu, her zaman ilgili bilimsel araştırmacıların her gün tekrar etmesi gereken temel bir görev olmuştur.
Numuneler arasındaki büyük farklılıklar nedeniyle, DNA ve RNA'nın ayırma ve ekstraksiyon süreçleri de çok farklıdır.Bu iş, operatörler için yüksek düzeyde teknik yeterlilik gerektirir.Geleneksel ayırma ve ekstraksiyon teknikleri, bazı oldukça toksik kimyasal reaktiflerle uzun süreli temas gerektirir.Operatörün vücudunda geri dönüşü olmayan hasarlara neden olacak ve hatta deney sırasında doğrudan hasara neden olacaktır.
Aynı zamanda, çalışacak çok sayıda örneği olanlar için, nükleik asitlerin ayrılması ve ekstraksiyonu emek yoğun bir iştir.
Piyasadaki nükleik asit izolasyon ve ekstraksiyon kitleri artık olgunlaştı ve birçok marka var ama aşağı yukarı aynılar.Silika jel membran kolon santrifüj kiti veya manyetik boncuk yöntemi kiti olsun, çok zaman alır ve maliyetlidir.Kit maliyetine ek olarak, laboratuvar ekipmanı için özel gereksinimler de vardır.Manyetik boncuk yönteminde kullanılan otomatikleştirilmiş iş istasyonu, laboratuvar için çok büyük bir masraf olan çok tipik, büyük ölçekli, yüksek değerli bir ekipmandır.
Özetle
PCR deneylerini gerçekleştirmeden önce, numunelerin ön işlemi kaçınılmazdır ve araştırmacılar için her zaman baş ağrısıdır.Bu sorunun nasıl çözüleceği ve nükleik asitlerin ayrıştırılması ve ekstraksiyonu olmadan PCR deneylerinin yapılıp yapılamayacağı, her zaman bilimsel araştırmacıların ve klinik laboratuvar personelinin çoğunluğunun düşüncesi olmuştur.
Foregene'nin Çözümü
Direct PCR teknolojisi ve ilgili kitler üzerinde yıllarca süren özenli araştırmaların ardından Forgene, birçok darboğazı başarıyla aştı ve güçlü direnç ve uyarlanabilirlik ile birçok farklı numune türü için doğrudan PCR'yi başarıyla gerçekleştirdi ve araştırmacıların nükleik asitlerin hantal ve tehlikeli ayırma ve ekstraksiyonundan kurtulmasına olanak sağladı.Bu, herkesin emek yoğunluğunu büyük ölçüde azaltacak, deney sürecini hızlandıracak ve bilimsel araştırma ve test maliyetlerinden tasarruf sağlayacaktır.
Forgene'in DirectPCR anlayışı ve bilgisi
Birincisi, DirectPCR teknolojisi, çeşitli biyolojik numune dokuları için doğrudan bir PCR teknolojisidir.Bu teknik koşul altında nükleik asitleri ayırmaya ve ekstrakte etmeye gerek yoktur ve doku örneği doğrudan nesne olarak kullanılır ve PCR reaksiyonu için hedef gen primerleri eklenir.
İkincisi, DirectPCR teknolojisi yalnızca geleneksel bir DNA şablonu amplifikasyon teknolojisi değildir, aynı zamanda RNA şablonu ters transkripsiyon PCR'yi de içerir.
Üçüncüsü, DirectPCR teknolojisi yalnızca doku numuneleri üzerinde rutin kalitatif PCR reaksiyonlarını doğrudan gerçekleştirmekle kalmaz, aynı zamanda reaksiyon sisteminin arka plan floresan girişimine direnme ve endojen floresan söndürücüleri antagonize etme konusunda güçlü bir yeteneğe sahip olmasını gerektiren Gerçek Zamanlı qPCR reaksiyonlarını da içerir.
Dördüncüsü, DirectPCR teknolojisi tarafından hedeflenen doku örnekleri yalnızca nükleik asit şablonlarının salınmasını gerektirir ve PCR reaksiyonuna müdahale eden proteinleri, polisakkaritleri, tuz iyonlarını vb. çıkarmaz.Bu, reaksiyon sistemindeki nükleik asit polimerazın ve PCR Karışımının mükemmel tersinmezliğe ve uyarlanabilirliğe sahip olmasını gerektirir ve karmaşık koşullar altında enzim aktivitesi ve replikasyon doğruluğunu sağlayabilir.
Beşincisi, DirectPCR teknolojisi tarafından hedeflenen doku örnekleri herhangi bir nükleik asit zenginleştirme işlemine tabi tutulmamıştır ve şablon miktarı çok küçüktür, bu da reaksiyon sisteminin son derece yüksek hassasiyetini ve amplifikasyon verimliliğini gerektirir.
Çözüm
DirectPCR teknolojisi, PCR teknolojisinin doğuşundan bu yana geçen 30 yıldaki en önemli teknolojik gelişmelerden ve yeniliklerden biridir.Forgene, bu teknolojinin öncüsü ve yenilikçisi olmuştur ve olmaya devam edecektir.
DirectPCR teknolojisinin uygulama beklentisi çok geniştir.Bu teknolojinin sürekli olarak iyileştirilmesi ve teşvik edilmesi, bilimsel araştırma ve teftiş çalışmalarına kesinlikle yıkıcı değişiklikler getirecektir.Bu bir PCR teknolojisi devrimidir.
Gönderim zamanı: 21 Şubat 2017
