Kan RNA İzolasyon Kiti
Takım Açıklaması:
Kat.No.RE-04011/04013
Tam kandan toplam RNA saflaştırması için 104 ≤ Beyaz Kan Hücreleri ≤ 107
Kan RNA'sını beyaz kan hücrelerinden hızla izole edin ve arındırın.
-RNA bozulması hakkında endişelenmenize gerek yok.Kitin tamamı RNaz İçermez
-Basit—tüm işlemler oda sıcaklığında tamamlanır
-Hızlı—işlem 20 dakikada tamamlanabilir
-Yüksek RNA verimi: Yalnızca RNA Sütunu ve benzersiz formül, RNA'yı verimli bir şekilde saflaştırabilir
-Güvenli—organik reaktif kullanılmaz
-Büyük numune işleme kapasitesi—her seferinde 200μl'ye kadar numune işlenebilir.
-Yüksek kalite—saflaştırılmış RNA son derece saftır, protein ve diğer safsızlıklar içermez ve çeşitli alt deneysel uygulamaları karşılayabilir.
Açıklamalar
Kit, şirketimiz tarafından geliştirilen ve antikoagüle edilmiş tam kandan yüksek saflıkta ve yüksek kaliteli toplam RNA'yı verimli bir şekilde çıkarabilen spin kolonu ve formülü kullanır.Kit, kırmızı kan hücrelerini hızlı ve verimli bir şekilde parçalayabilen ve beyaz kan hücrelerini tutabilen kırmızı kan hücresi lizatı (Buffer RCL) sağlar.Verimli DNA Temizleme Kolonu, süpernatanı ve hücre lizatlarını kolayca ayırabilir ve genomik DNA'yı adsorbe edebilir ve çıkarabilir.İşlem basittir ve zaman kazandırır;Yalnızca RNA Sütunu, RNA'yı verimli bir şekilde bağlayabilir ve benzersiz bir formülle aynı anda çok sayıda örneği işleyebilir.
Tüm sistem RNaz İçermez, çıkarılan RNA'yı bozunmaz hale getirir;Buffer RW1 ve Buffer RW2 tampon yıkama sistemi, elde edilen RNA'yı protein, DNA, iyon ve organik bileşik kirliliğinden arındırır.
Kit İçeriği
| Kan Total RNA İzolasyon Kiti | ||
| Kit bileşimi | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 kere | 200 kez | |
| Tampon RCL (10×) | 52,5 mL | 210mL |
| Tampon BRL1* | 30mL | 120mL |
| Tampon BRL2 | 18mL | 66mL |
| Tampon RW1* | 25mL | 100mL |
| Tampon RW2 | 24mL | 96mL |
| RNaz İçermeyen ddH2 O | 10mL | 40mL |
| Yalnızca RNA Sütunu | 50 takım | 200 takım |
| DNA Temizleme Kolonu | 50 takım | 200 takım |
| Manuel | 1 kopya | 1 kopya |
Özellikler ve avantajlar
-RNA bozulması hakkında endişelenmenize gerek yok.Kitin tamamı RNaz İçermez.
-Basit—tüm işlemler oda sıcaklığında tamamlanır.
-Hızlı—işlem 20 dakikada tamamlanabilir.
-Yüksek RNA verimi: Yalnızca RNA Sütunu ve benzersiz formül, RNA'yı verimli bir şekilde saflaştırabilir.
-Güvenli—organik reaktif kullanılmaz.
-Büyük numune işleme kapasitesi—her seferinde 200μl'ye kadar numune işlenebilir.
-Yüksek kalite—saflaştırılmış RNA son derece saftır, protein ve diğer safsızlıklar içermez ve çeşitli alt deneysel uygulamaları karşılayabilir.
Kit parametreleri
Kit uygulaması:
Memeli tam kanından toplam RNA'nın ekstraksiyonu ve saflaştırılması için uygundur.
iş akışı
Depolama koşulları
Tampon RCL (10×) 2-8 ℃'de saklanmalıdır;kitin diğer bileşenleri oda sıcaklığında (15-25 ℃) kuru koşullarda saklanabilir ve 12 ay saklanabilir.Tampon BRL1, β-merkaptoetanol (isteğe bağlı) eklendikten sonra 4 ℃'de 1 ay saklanabilir.
Not: Düşük sıcaklıkta saklanırsa çözelti çökelmeye eğilimlidir.Kullanmadan önce kit içindeki solüsyonu bir süre oda sıcaklığında tuttuğunuzdan emin olun.Gerekirse çökeltiyi çözmek için 37°C su banyosunda 10 dakika önceden ısıtın ve kullanmadan önce iyice karıştırın.
Sorun analizi için kılavuzlar
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Hiçbir RNA ekstrakte edilemez veya nükleik asit verimi düşüktür
Genellikle geri kazanım verimliliğini etkileyen birçok faktör vardır, örneğin: numune RNA içeriği, çalışma yöntemi, elüsyon hacmi, vb.
Yaygın nedenlerin analizi：
1.Çalışma sırasında buz banyosu veya düşük sıcaklıkta (4 °C) santrifüjleme.
Öneri: Oda sıcaklığında (15-25°C) çalışma, kesinlikle buz banyosu ve düşük sıcaklıkta santrifüj.
2. Uygun olmayan numune saklama veya numuneyi çok uzun süre saklama.
Öneri: Numuneleri -80 °C'de saklayın veya sıvı nitrojen içinde dondurun ve tekrarlanan donma-çözülme kullanımından kaçının;RNA ekstraksiyonu için yeni toplanmış örnekleri kullanmayı deneyin.
3. Yetersiz numune parçalanması
Öneri: Lütfen numune ve çalışma solüsyonunun (Lineer Akrilamid) iyice karıştırıldığından ve oda sıcaklığında (15-25 °C) 10 dakika inkübe edildiğinden emin olun.
4. Eluent yanlış eklendi
Öneri: Saflaştırma sütununun zarının ortasına RNaz İçermeyen ddH2O eklendiğinden emin olun.
5. Tampon viRW2'de uygun olmayan susuz etanol hacmi
Öneri: Lütfen talimatları izleyin, Buffer viRW2'ye doğru hacimde susuz etanol ekleyin ve kiti kullanmadan önce iyice karıştırın.
6.Yanlış numune kullanımı.
Öneri: 500μl Buffer viRL başına 200μl numune.Aşırı numune hacmi, RNA ekstraksiyon oranının düşmesine neden olur.
7. Uygun olmayan elüsyon hacmi veya eksik elüsyon.
Öneri: Saflaştırma kolonunun eluent hacmi 30-50μl'dir;elüsyon etkisi tatmin edici değilse önceden ısıtılmış RNaz İçermeyen ddH eklenmesi önerilir2O ve 5-10dk gibi oda sıcaklığında yerleştirme süresini uzatın
8. Saflaştırma sütununda Tampon viRW2 içinde durulandıktan sonra etanol kalıntısı var.
Öneri: Tampon viRW2 içinde durulandıktan ve 2 dakika boş tüp santrifüjlendikten sonra hala etanol kalırsa, saflaştırma kolonu, kalan etanolü tamamen çıkarmak için boş tüp santrifüjlemeden sonra 5 dakika oda sıcaklığında bırakılabilir.
Saflaştırılmış RNA moleküllerinin bozunması
Saflaştırılmış RNA'nın kalitesi örneğin saklanması, RNaz kontaminasyonu ve çalışması gibi faktörlerle ilişkilidir.
Yaygın nedenlerin analizi：
1. Toplanan numuneler zamanında kaydedilmedi.
Öneri: Numune toplandıktan sonra zamanında kullanılmazsa, lütfen hemen -80 ℃'de veya sıvı nitrojende saklayın.RNA moleküllerinin ekstraksiyonu için, mümkün olduğunda taze toplanmış numuneleri kullanmaya çalışın.
2. Toplanan numuneler tekrar tekrar dondurulup çözülüyordu.
Öneri: Numune toplama ve saklama sırasında tekrar tekrar dondurma ve çözme işleminden (bir defadan fazla) kaçının, aksi takdirde nükleik asit verimi azalır.
3.RNase ameliyathanede tanıtıldı veya tek kullanımlık eldiven, maske vb. giyilmedi.
Öneri: RNA moleküllerinin ekstraksiyonu deneyi en iyi şekilde ayrı bir RNA ameliyathanesinde yapılır ve deney masası deneyden önce temizlenir.RNase girişinin neden olduğu RNA bozulmasını önlemek için deney sırasında tek kullanımlık eldivenler ve maskeler giyin.
4. Reaktif, kullanım sırasında RNase ile kontamine olur.
Öneri: İlgili deneyler için yeni Viral RNA İzolasyon Kiti ile değiştirin.
5. Santrifüj tüplerinin, pipet uçlarının vb. RNaz kontaminasyonu. Öneri: Santrifüj tüplerinin, pipet uçlarının ve pipetlerin RNaz İçermediğinden emin olun.
Saflaştırılmış RNA molekülleri aşağı akış deneylerini etkiledi
Ters transkripsiyon, Northern Blot, vb. gibi çok fazla tuz iyonu veya protein varsa, saflaştırma sütunu tarafından saflaştırılan RNA molekülleri aşağı akış deneylerini etkileyecektir.
1. Ayrılan RNA moleküllerinde kalan tuz iyonları vardır.
Öneri: Buffer viRW2'ye doğru hacimde susuz etanol eklendiğinden emin olun ve saflaştırma kolonunu çalıştırma talimatlarındaki doğru santrifüjleme hızına göre iki kez yıkayın; Hala tuz iyonları varsa, saflaştırma kolonuna Tampon viRW2 ekleyebilir ve 5 dakika oda sıcaklığında bırakabilirsiniz.Ardından, tuz iyonları kontaminasyonunu büyük ölçüde gidermek için santrifüjleme yapın
2. Ayrılan RNA moleküllerinde kalan etanol var
Öneri: Saflaştırma sütunlarının Buffer viRW2 tarafından durulandığını onayladıktan sonra, çalıştırma talimatlarındaki santrifüj hızına göre boş tüp santrifüjleme gerçekleştirin.Hala etanol kalmışsa, kalan etanolün büyük ölçüde uzaklaştırılması için boş tüp santrifüjlemeden sonra 5 dakika oda sıcaklığında bırakılabilir.
Kullanım kılavuzları:
Viral RNA İzolasyon Kiti Kullanım Kılavuzu
