Saflaştırılmamış Numune için 2× Konsantre Premiks için Çin Üreticisi Gerçek Zamanlı Kantitatif PCR Doğrudan Multipleks Prob Qpcr Mix Plus U
Organizasyon, "bilimsel yönetim, yüksek kalite ve verimlilik önceliği, alıcının üstün olduğu Çin Üreticisi Saflaştırılmamış Numune için 2x Konsantre Premiks Gerçek Zamanlı Kantitatif PCR Doğrudan Multipleks Prob Qpcr Mix Plus U," prosedür konseptini sürdürüyor.
Organizasyon, “bilimsel yönetim, yüksek kalite ve verimlilik önceliği, alıcı için yüce” prosedür konseptini sürdürüyor.Çin Taq DNA Polimeraz ve Qpcr, Firmamız bol güce sahiptir ve istikrarlı ve mükemmel bir satış ağı sistemine sahiptir.Yurtiçi ve yurtdışındaki tüm müşterilerle karşılıklı yarar temelinde sağlam iş ilişkileri kurabilmeyi diliyoruz.
Real Time PCR primer tasarım ilkeleri
İleri Astar ve Ters Astar
Real Time PCR için primer tasarımı çok önemlidir.Primerler, PCR amplifikasyonunun özgüllüğü ve etkinliği ile ilgilidir ve aşağıdaki ilkelere göre tasarlanabilir:
- Astar uzunluğu: 18-30bp.
- GC içeriği: %40-60.
- Tm değeri: Primer 5 gibi primer tasarım yazılımları primerin Tm değerini verebilir.Yukarı ve aşağı primerlerin Tm değerleri mümkün olduğu kadar yakın olmalıdır.Tm hesaplama formülü de kullanılabilir: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR yapılırken, genellikle 5 °C'lik primer Tm değerinin altındaki bir sıcaklık, tavlama sıcaklığı olarak seçilir (tavlama sıcaklığındaki karşılık gelen artış, PCR reaksiyonunun özgüllüğünü artırabilir).
- Primerler ve PCR ürünleri:
- Tasarım primeri PCR amplifikasyon ürünü uzunluğu tercihen 100-150bp'dir.
- Şablonun ikincil yapısal alanındaki tasarım astarlarından mümkün olduğunca kaçınılmalıdır.
- Yukarı ve aşağı primerlerin 3' uçları arasında 2 veya daha fazla tamamlayıcı baz oluşumundan kaçının.
- Primer 3' terminal tabanı, ardışık 3 ek G veya C ile mevcut olamaz.
- Primerlerin kendileri tamamlayıcı yapılara sahip olamazlar, aksi takdirde PCR amplifikasyonunu etkileyen saç tokası bir yapı oluşacaktır.
- ATCG, primer sekansında mümkün olduğu kadar eşit dağıtılmalı ve T olarak 3' terminal tabanından kaçınılmalıdır.
Ek1:Cell DoğrudanRT-qPCR Kit bileşenlerit ek paket
1. Hücre Parçalama Çözümü
Hücre Parçalama Çözümü | |||
Kit bileşenleri (24 kuyulu lizis sistemi / kuyu) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ton | 500 ton | ||
ParçaBEN | Tampon CL | 20 mi | 100 mi |
Foregene Proteaz Plus II | 400 ul | 1 ml × 2 | |
Tampon ST | 1 ml × 2 | 10 mi | |
ParçaIII | DNA Silgisi | 400 ul | 1 ml × 2 |
RT Karışımı | |
Kit bileşenleri (20 ul reaksiyon sistemi) | DRT-01011-B1 |
200 ton | |
5× Doğrudan RT Karışımı | 800 ul |
RNaz İçermeyen ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR Karışımı | ||
Kit bileşenleri (20 ul reaksiyon sistemi) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 ton | 1000 ton | |
2× Doğrudan qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX Referans Boyası | 40 ul | 200 ul |
RNaz İçermeyen ddH2O | 1.7 ml | 10 mi |
Organizasyon, "bilimsel yönetim, yüksek kalite ve verimlilik önceliği, alıcının üstün olduğu Çin Üreticisi Saflaştırılmamış Numune için 2x Konsantre Premiks Gerçek Zamanlı Kantitatif PCR Doğrudan Multipleks Prob Qpcr Mix Plus U," prosedür konseptini sürdürüyor.
Çin ÜreticiÇin Taq DNA Polimeraz ve Qpcr, Firmamız bol güce sahiptir ve istikrarlı ve mükemmel bir satış ağı sistemine sahiptir.Yurtiçi ve yurtdışındaki tüm müşterilerle karşılıklı yarar temelinde sağlam iş ilişkileri kurabilmeyi diliyoruz.
Real Time PCR primer tasarım ilkeleri
İleri Astar ve Ters Astar
Real Time PCR için primer tasarımı çok önemlidir.Primerler, PCR amplifikasyonunun özgüllüğü ve etkinliği ile ilgilidir ve aşağıdaki ilkelere göre tasarlanabilir:
- Astar uzunluğu: 18-30bp.
- GC içeriği: %40-60.
- Tm değeri: Primer 5 gibi primer tasarım yazılımları primerin Tm değerini verebilir.Yukarı ve aşağı primerlerin Tm değerleri mümkün olduğu kadar yakın olmalıdır.Tm hesaplama formülü de kullanılabilir: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR yapılırken, genellikle 5 °C'lik primer Tm değerinin altındaki bir sıcaklık, tavlama sıcaklığı olarak seçilir (tavlama sıcaklığındaki karşılık gelen artış, PCR reaksiyonunun özgüllüğünü artırabilir).
- Primerler ve PCR ürünleri:
- Tasarım primeri PCR amplifikasyon ürünü uzunluğu tercihen 100-150bp'dir.
- Şablonun ikincil yapısal alanındaki tasarım astarlarından mümkün olduğunca kaçınılmalıdır.
- Yukarı ve aşağı primerlerin 3' uçları arasında 2 veya daha fazla tamamlayıcı baz oluşumundan kaçının.
- Primer 3' terminal tabanı, ardışık 3 ek G veya C ile mevcut olamaz.
- Primerlerin kendileri tamamlayıcı yapılara sahip olamazlar, aksi takdirde PCR amplifikasyonunu etkileyen saç tokası bir yapı oluşacaktır.
- ATCG, primer sekansında mümkün olduğu kadar eşit dağıtılmalı ve T olarak 3' terminal tabanından kaçınılmalıdır.
Ek1:Cell DoğrudanRT-qPCR Kit bileşenlerit ek paket
1. Hücre Parçalama Çözümü
Hücre Parçalama Çözümü | |||
Kit bileşenleri (24 kuyulu lizis sistemi / kuyu) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ton | 500 ton | ||
ParçaBEN | Tampon CL | 20 mi | 100 mi |
Foregene Proteaz Plus II | 400 ul | 1 ml × 2 | |
Tampon ST | 1 ml × 2 | 10 mi | |
ParçaIII | DNA Silgisi | 400 ul | 1 ml × 2 |
RT Karışımı | |
Kit bileşenleri (20 ul reaksiyon sistemi) | DRT-01011-B1 |
200 ton | |
5× Doğrudan RT Karışımı | 800 ul |
RNaz İçermeyen ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR Karışımı | ||
Kit bileşenleri (20 ul reaksiyon sistemi) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 ton | 1000 ton | |
2× Doğrudan qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX Referans Boyası | 40 ul | 200 ul |
RNaz İçermeyen ddH2O | 1.7 ml | 10 mi |
Kullanım kılavuzları: