• Facebook
  • Linkedin
  • Youtube
sayfa_banner

Foreasy HS Taq DNA Polimeraz

Takım Açıklaması:

Yüksek özgüllük: Yüksek hot-start aktivitesine sahip enzim.

Hızlı Amplifikasyon: 10 sn/kb.

Yüksek şablon uyarlanabilirliği: Yüksek'i verimli bir şekilde yükseltmek için kullanılabilirGCdeğerVeçoğaltılması zor çeşitli DNA şablonu.

Güçlü sadakat: Sadakat 6 katof sıradan Taq Enzimi.

foregene gücü


Ürün ayrıntısı

Ürün etiketleri

SSS

Tanım

Foreasy HS Taq DNA Polimeraz, gen rekombinasyon teknolojisi ile Escherichia coli mühendislik bakterilerinde ifade edilen yeni bir Taq enzimidir.Enzim özel bir işlemle işlendikten sonra'aktivitesi termal aktivasyondan önce inhibe edilir, böylece düşük sıcaklık koşulları altında primerlerin veya primer dimerlerin spesifik olmayan tavlanmasının neden olduğu spesifik olmayan amplifikasyon inhibe edilir.Bu ürün, oldukça spesifik PCR React için uygundur.iyon, Çoklu x PCR , yüksek GC içeriği ( > %60 ),ileikincil yapıveya diğerigüçlü arka plan genomuicsamplifikasyon ve büyük ölçekli genomicsamplifikasyon tespiti.Enzim 5' → 3' DNA polimeraz aktivitesine ve 5' → 3' ekzonükleaz aktivitesine sahiptir, ancak 3' → 5' ekzonükleaz aktivitesine sahip değildir.

Kit bileşenleri

Bileşen IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNA Polimeraz (5 U/μL)  5000 Ünite (1 mL)  50 KU (10 mL)  500 KU (100 mL)
2× Taq Reaksiyon Tamponu  25mL ×5  250 mL ×5  500 mL × 25

Özellikler ve avantajlar

- Yüksek özgüllük: Hot-start aktivitesi yüksek olan enzim.

- Hızlı Amplifikasyon: 10 sn/kb.

- Yüksek şablon uyarlanabilirliği: Yüksek'i verimli bir şekilde yükseltmek için kullanılabilirGCdeğerVeçoğaltılması zor çeşitli DNA şablonu.

- Güçlü sadakat: Aslına uygunluk 6 katof sıradan Taq Enzimi.

Kit uygulaması

- Çeşitli PCR/qPCR Sistemi ve direkt PCR sistemi

- PCR Güçlendirilmiş DNA Fragmanı

- DNA işareti

- DNA dizilimi

- PCR artı A kuyruğu

Etkinlik Tanımı

1U : 10 nmol dahil etmek için gereken enzim miktarıDNAşablon / primer olarak aktive edilmiş somon sperm DNA'sı kullanılarak asitte çözünmeyen maddeye dönüştürülür, 74 °C, 30 dakika.

Reaksiyon Durumu

Sıcaklık Reaksiyon süresi Devir süresi
37°C 5 dakika 1
94°C 5 dakika 1
94°C 10 sn  40
60°C 10 sn

Not:10 µL ve 20 µL sistemler için, termal döngüleyicinin ısı kapağı yoksa eşit hacimde mineral yağ ekleyin.

PCR reaksiyon koşulları, şablonların, primerlerin ve benzerlerinin yapısal koşullarına bağlı olarak değişir.Spesifik operasyonda, şablon tipi, hedef fragmanın boyutu, amplifiye fragmanın baz dizisi ve primerin GC içeriği ve uzunluğu gibi spesifik koşullara göre tavlama sıcaklığı, uzatma süresi vb. dahil olmak üzere en uygun reaksiyon koşullarını tasarlamak gerekir.

Depolamak

-20 ± 5 °C'de 2 yıl veya -80 °C'de uzun süreli saklama için.


  • Öncesi:
  • Sonraki:

  • Amplifikasyon sinyali yok

    1.Kitteki Taq DNA Polimeraz, kitin yanlış saklanması veya son kullanma tarihinin geçmesi nedeniyle aktivitesini kaybeder.
    Öneri: Kitin saklama koşullarını onaylayın;PCR sistemine yeniden uygun miktarda Taq DNA Polimeraz ekleyin veya ilgili deneyler için yeni bir Real Time PCR Kiti satın alın.

    2. DNA şablonunda çok sayıda Taq DNA Polimeraz inhibitörü vardır.
    Öneri: Şablonu yeniden saflaştırın veya kullanılan şablon miktarını azaltın.

    3.Mg2+ konsantrasyonu uygun değil.
    Öneri: Sağladığımız 2× Real PCR Mix'in Mg2+ konsantrasyonu 3,5 mM'dir.Ancak bazı özel primerler ve şablonlar için Mg2+ konsantrasyonu daha yüksek olabilir.Bu nedenle, Mg2+ konsantrasyonunu optimize etmek için doğrudan MgCl2 ekleyebilirsiniz.Optimizasyon için her seferinde Mg2+ 0,5 mM'nin artırılması önerilir.

    4. PCR amplifikasyon koşulları uygun değil ve primer dizisi veya konsantrasyonu uygun değil.
    Öneri: primer dizisinin doğruluğunu ve primerin bozulmadığını onaylayın;amplifikasyon sinyali iyi değilse tavlama sıcaklığını düşürmeye çalışın ve primer konsantrasyonunu uygun şekilde ayarlayın.

    5. Kalıp miktarı çok az veya çok fazla.
    Öneri: Şablon doğrusallaştırma gradyan seyreltmesi gerçekleştirin ve Real Time PCR deneyi için en iyi PCR etkisine sahip şablon konsantrasyonunu seçin.

    NTC'nin çok yüksek floresan değeri var

    1. Çalışma sırasında oluşan reaktif kontaminasyonu.
    Öneri: Real Time PCR deneyleri için yeni reaktiflerle değiştirin.

    2.PCR reaksiyon sisteminin hazırlanması sırasında kontaminasyon meydana geldi.
    Öneri: Çalıştırma sırasında gerekli koruyucu önlemleri alın, örneğin: lateks eldiven giymek, filtreli bir pipet ucu kullanmak, vb.

    3. Primerler bozulur ve primerlerin bozunması spesifik olmayan amplifikasyona neden olur.
    Öneri: Primerlerin bozulup bozulmadığını saptamak için SDS-PAGE elektroforezi kullanın ve Real Time PCR deneyleri için bunları yeni primerlerle değiştirin.

    Primer dimer veya spesifik olmayan amplifikasyon

    1.Mg2+ konsantrasyonu uygun değil.
    Öneri: Sağladığımız 2× Real PCR EasyTM Mix'in Mg2+ konsantrasyonu 3,5 mM'dir.Ancak bazı özel primerler ve şablonlar için Mg2+ konsantrasyonu daha yüksek olabilir.Bu nedenle, Mg2+ konsantrasyonunu optimize etmek için doğrudan MgCl2 ekleyebilirsiniz.Optimizasyon için her seferinde Mg2+ 0,5 mM'nin artırılması önerilir.

    2. PCR tavlama sıcaklığı çok düşük.
    Öneri: PCR tavlama sıcaklığını her seferinde 1°C veya 2°C artırın.

    3. PCR ürünü çok uzun.
    Öneri: Real Time PCR ürününün uzunluğu 100-150bp arasında olmalı, 500bp'den fazla olmamalıdır.

    4. Primerler bozulur ve primerlerin bozunması spesifik amplifikasyonun ortaya çıkmasına neden olur.
    Öneri: Primerlerin bozulup bozulmadığını saptamak için SDS-PAGE elektroforezi kullanın ve Real Time PCR deneyleri için bunları yeni primerlerle değiştirin.

    5.PCR sistemi uygun değil veya sistem çok küçük.
    Öneri: PCR reaksiyon sisteminin çok küçük olması tespit doğruluğunun azalmasına neden olacaktır.Real Time PCR deneyini yeniden çalıştırmak için kantitatif PCR cihazı tarafından önerilen reaksiyon sistemini kullanmak en iyisidir.

    Kantitatif değerlerin zayıf tekrarlanabilirliği

    1. Cihaz arızalı.
    Öneri: Aletin her bir PCR deliği arasında hatalar olabilir, bu da sıcaklık yönetimi veya algılama sırasında zayıf tekrar üretilebilirliğe yol açar.Lütfen ilgili cihazın talimatlarına göre kontrol edin.

    2. Numune saflığı iyi değil.
    Öneri: Saf olmayan numuneler, şablonun ve primerlerin saflığını içeren deneyin zayıf tekrarlanabilirliğine yol açacaktır.Şablonu yeniden saflaştırmak en iyisidir ve primerler en iyi şekilde SDS-PAGE ile saflaştırılır.

    3.PCR sistemi hazırlama ve saklama süresi çok uzun.
    Öneri: Real Time PCR sistemini PCR deneyi için hazırladıktan hemen sonra kullanın ve çok uzun süre kenarda bırakmayın.

    4. PCR amplifikasyon koşulları uygun değil ve primer dizisi veya konsantrasyonu uygun değil.
    Öneri: primer dizisinin doğruluğunu ve primerin bozulmadığını onaylayın;amplifikasyon sinyali iyi değilse tavlama sıcaklığını düşürmeye çalışın ve primer konsantrasyonunu uygun şekilde ayarlayın.

    5.PCR sistemi uygun değil veya sistem çok küçük.
    Öneri: PCR reaksiyon sisteminin çok küçük olması tespit doğruluğunun azalmasına neden olacaktır.Real Time PCR deneyini yeniden çalıştırmak için kantitatif PCR cihazı tarafından önerilen reaksiyon sistemini kullanmak en iyisidir.

    Mesajınızı buraya yazın ve bize gönderin.