Pipet uçlarının ve EP tüplerinin vb. sterilizasyonu.

1. %0,1 (binde bir) DEPC'yi (çok zehirli madde) deiyonize suyla hazırlayın, çeker ocakta dikkatli kullanın ve ışıktan uzakta 4°C'de saklayın;

DEPC suyu, DEPC ile işlenmiş ve yüksek sıcaklık ve yüksek basınçla sterilize edilmiş saf sudur.RNaz, DNaz ve proteinaz içermediği test edilmiştir.

2. Pipet ucunu ve EP tüpünü %0,1 DEPC'ye koyun ve pipet ucunun ve EP tüpünün %0,1 DEP ile dolu olduğundan emin olun.

3. Işıktan koruyun, bir gece bekletin (12-24 saat)

4. Ucu ve EP tüpünü içeren kutunun DEPC'ye batırılmasına gerek yoktur.Uçtaki veya EP tüpündeki DEPC suyunu kabaca çıkardıktan sonra, paketleyin ve sarın.

5. 121 santigrat derece, 30dk

6. 180 santigrat derece, birkaç saat kurutun (en az 3 saat)

Çay yok.DEPC ile çalışırken lateks eldiven ve maske takın!b veya DEPC sterilizasyonu olmadan, 130 ℃, 90dk otoklav (birçok laboratuvar iki kez yüksek sıcaklıkta sterilizasyon)

RNA çıkarma hususları

Doku RNA izolasyon başarısızlığının iki ana fenomeni

Dokularda RNA yıkımı ve safsızlık kalıntıları,bozunma ile ilgili olarak, önce kültürlenmiş hücrelerden ekstrakte edilen RNA'nın neden kolayca bozulmadığına bakalım.Mevcut RNA ekstraksiyon reaktiflerinin tümü, RNaz'ı hızla inhibe eden bileşenler içerir.Lizatı kültürlenmiş hücrelere ekleyin ve basitçe karıştırın, tüm hücreler lizatla iyice karışabilir ve hücreler tamamen parçalanır.Hücreler parçalandıktan sonra, lizattaki aktif bileşenler hücre içi RNaz'ı hemen inhibe eder, böylece RNA bozulmadan kalır.Başka bir deyişle, kültürlenmiş hücreler lizatla kolayca ve tam olarak temas ettiğinden, RNA'ları kolayca bozulmaz;Öte yandan, dokudaki RNA, dokudaki hücrelerin lizatla hızlı bir şekilde temas etmesi kolay olmadığı için kolayca bozulur.yeterli temas nedeniyle.Bu yüzden,RNA aktivitesini inhibe ederken dokuyu tek bir hücreye dönüştürmenin bir yolu olduğunu varsayarsak, bozunma sorunu tamamen çözülebilir.

Sıvı nitrojen öğütme bu türdeki en etkili yöntemdir.Bununla birlikte, sıvı nitrojen öğütme yöntemi, özellikle numune sayısı fazla olduğunda çok zahmetlidir.Bu, bir sonraki en iyi şeye yol açtı: homojenleştirici.buhomojenleştiriciyöntem, hücreler lizatla temas etmeden önce RNaz aktivitesinin nasıl inhibe edildiği sorusunu dikkate almaz, bunun yerine doku bozulma hızının, hücre içi RNaz'ın RN'yi bozduğu hızdan daha hızlı olması için dua eder.

Elektrikli homojenleştiricinin etkisi daha iyidir,ve cam homojenleştiricinin etkisi zayıftır, ancak genel olarak homojenleştirici yöntemi bozunma olayını önleyemez.Bu nedenle, eğer ekstraksiyon bozulursa, sıvı nitrojen ile öğütme için orijinal elektrikli homojenleştirici kullanılmalıdır;orijinal cam homojenleştirici elektrikli homojenleştirici ile değiştirilmeli veya doğrudan sıvı nitrojenle öğütülmelidir.Sorun neredeyse %100 uygulanabilir.çözülsün

Sonraki deneyleri etkileyen safsızlık kalıntısı probleminin bozunmadan daha çeşitli nedenleri vardır ve buna uygun olarak çözümler de farklıdır.Sonuç olarak,dokuda bozunma veya artık safsızlıklar varsa, spesifik deney materyali için ekstraksiyon yöntemi/reaktifi optimize edilmelidir.Optimizasyon için değerli numunelerinizi kullanmak zorunda değilsiniz: pazardan balık/tavuk gibi bazı küçük hayvanları satın alabilir, malzemenin ilgili kısmını RNA ekstraksiyonu için ve diğer kısmını protein ekstraksiyonu için alabilirsiniz – ağız, mide ve bağırsak Ekstraktıyla öğütün.

Çıkarılan RNA'nın hedef RNA'sı, farklı takip deneyleri için kullanılır ve kalite gereksinimleri farklıdır.

cDNA kitaplığı yapısı, enzim reaksiyon inhibitörlerinin kalıntıları olmadan RNA bütünlüğü gerektirir;Northern, daha yüksek RNA bütünlüğü ve enzim reaksiyonu inhibitör kalıntıları için daha düşük gereksinimler gerektirir;RT-PCR çok yüksek RNA bütünlüğü gerektirmez,ancak enzim reaksiyonlarını inhibe eder.Kalıntı gereklilikleri katıdır.Girdi çıktıyı belirler;amaç her zaman en yüksek saflıkta RNA'yı elde etmek olduğunda, insanlara ve paraya mal olacaktır.

Numunelerin Toplanması/Saklanması

Parçalanmayı Etkileyen Faktörler Örnek canlı vücudu/veya orijinal büyüme ortamını terk ettikten sonra, örnekteki endojen enzimler RNA'yı parçalamaya başlayacak,ve bozunma hızı, endojen enzimlerin içeriği ve sıcaklık ile ilgilidir.Geleneksel olarak, endojen enzim aktivitesini tamamen engellemenin yalnızca iki yolu vardır: lizatı hemen ekleyin ve iyice ve hızlı bir şekilde homojenleştirin;küçük parçalar halinde kesin ve hemen sıvı nitrojen içinde dondurun.Her iki yaklaşım da hızlı işlem gerektirir.İkincisi tüm numuneler için uygundur, birincisi ise yalnızca düşük hücre içeriğine ve endojen enzimlere sahip ve homojenleştirilmesi daha kolay olan dokular için uygundur.Spesifik olarak, bitki dokusu, karaciğer, timus, pankreas, dalak, beyin, yağ, kas dokusu vb. Devam etmeden önce sıvı nitrojen ile en iyi şekilde dondurulur.

Numunelerin parçalanması ve homojenleştirilmesi

Bozulmayı ve Verimi Etkileyen Faktörler Numune parçalanmasıkapsamlı homojenleştirme için, RNA'nın tam ve tam olarak salınması içindir.Hücreler kırılmadan doğrudan homojenize edilebilir.Dokular ancak parçalandıktan sonra homojen hale getirilebilir.Maya ve bakterilerin homojenleştirilmeden önce karşılık gelen enzimlerle parçalanması gerekir.Daha düşük endojen enzim içeriğine ve daha kolay homojenizasyona sahip dokular, bir homojenleştirici tarafından lizat içinde tek seferde ezilip homojenleştirilebilir;bitki dokusu, karaciğer, timus, pankreas, dalak, beyin, yağ, kas dokusu ve diğer numuneler, Endojen enzimleri yüksektir veya kolayca homojenize olmazlar,bu nedenle doku parçalanması ve homojenizasyon ayrı ayrı yapılmalıdır..Parçalamanın en güvenilir ve en verimli yöntemi, sıvı nitrojenle öğütmedir ve en güvenilir homojenleştirme yöntemi, bir elektrikli homojenleştiricinin kullanılmasıdır.Sıvı nitrojenle öğütme hakkında özel bir not: Endojen enzimlerin dondurulduğunda işlev görme olasılığı daha yüksek olduğundan, numune tüm öğütme işlemi boyunca çözülmemelidir.

lizat seçimi

İşlemin rahatlığını ve kalıntı endojen safsızlık faktörlerini etkileyen Yaygın olarak kullanılan lizis çözeltileri, RNaz aktivitesini neredeyse inhibe edebilir.Bu nedenle, bir lizis çözeltisi seçmenin kilit noktası, saflaştırma yöntemiyle birlikte düşünmektir.Bir istisna vardır:yüksek endojen enzim içeriğine sahip numunelerin, endojen enzimleri inaktive etme yeteneğini artırmak için fenol içeren bir lizat kullanılması önerilir.

Arıtma yöntemi seçimi

Kalıntı endojen safsızlıkları, ekstraksiyon hızını etkileyen faktörler Hücreler gibi temiz numuneler için eldeki hemen hemen her saflaştırma yöntemiyle tatmin edici sonuçlar elde edilebilir.Ancak diğer birçok numune için, özellikle bitkiler, karaciğer, bakteri vb. gibi yüksek düzeyde safsızlık içerenler için uygun bir saflaştırma yönteminin seçilmesi çok önemlidir.Kolon santrifüj saflaştırma yöntemi, yüksek bir ekstraksiyon hızına sahiptir ve RNA'nın müteakip enzimatik reaksiyonunu etkileyen safsızlıkları etkili bir şekilde giderebilir, ancak pahalıdır (Foregene uygun maliyetli kitler sunabilir, daha fazla ayrıntı için tıklayınBurada);LiCl çöktürme gibi ekonomik ve klasik saflaştırma yöntemleri kullanılarak da tatmin edici sonuçlar elde edilebilir ancak işlem süresi uzundur..

RNA Ekstraksiyonu için “Üç Disiplin ve Sekiz Dikkat”

Disiplin 1:Eksojen enzimlerin kirlenmesine son verin.

Not 1:Kesinlikle maske ve eldiven kullanın.

Not 2:Deneyde yer alan santrifüj tüpleri, Tip kafaları, pipet çubukları, elektroforez tankları ve deney tezgahları tamamen atılmalıdır.

Not 3:Deneyde yer alan reaktifler/çözeltiler, özellikle su, RNaz içermemelidir.

Disiplin 2:Endojen enzimlerin aktivitesini bloke edin

Not 4:Uygun bir homojenleştirme yöntemi seçin.

Not 5:Uygun bir lizat seçin.

Not 6:Numunenin başlangıç ​​miktarını kontrol edin.

Disiplin 3:Çıkarma amacınızı netleştirin

Not 7:Maksimum başlangıç ​​numune miktarına yaklaşan herhangi bir lizat sistemi ile ekstraksiyon başarı oranı keskin bir şekilde düşer.

Not 8:Başarılı RNA ekstraksiyonu için tek ekonomik kriter, verim değil, sonraki deneylerdeki başarıdır.

RNase Kontaminasyonunun İlk 10 Kaynağı

1. Parmaklar eksojen enzimlerin ilk kaynağıdır, bu nedenle eldiven giyilmeli ve sık sık değiştirilmelidir.Ayrıca solunum da önemli bir enzim kaynağı olduğu için maske de takılmalıdır.Eldiven maskesi takmanın ek bir yararı da deneyi yapan kişiyi korumaktır.

2. Pipet uçları, santrifüj tüpleri, pipetler – RNaz tek başına sterilizasyonla inaktive edilemez, bu nedenle pipet uçları ve santrifüj tüpleri, DEPC ile işlendi olarak işaretlenmiş olsalar bile, DEPC ile işlenmelidir.Özel amaçlı bir pipet kullanmak en iyisidir, kullanmadan önce %75 alkollü pamukla, özellikle çubukla silin;ayrıca kafa çıkarıcı kullanmadığınızdan emin olun.

3. Su/tampon, RNaz kontaminasyonu içermemelidir.

4. Test masası en azından %75 alkollü pamuk toplarla silinerek temizlenmelidir.

5.Endojen RNaz Tüm dokular endojen enzimler içerir, bu nedenle dokuların sıvı nitrojenle hızlı bir şekilde dondurulması bozulmayı azaltmanın en iyi yoludur.Sıvı nitrojen depolama/öğütme yöntemi gerçekten elverişsizdir, ancak yüksek düzeyde endojen enzim içeren dokular için tek yoldur.

6. RNA numuneleri RNA ekstraksiyon ürünleri eser miktarda RNaz kontaminasyonu içerebilir.

7. Plazmid ekstraksiyonu Plazmid ekstraksiyonu genellikle RNA'yı parçalamak için Rnaz kullanır ve artık Rnaz Proteinaz K ile sindirilmeli ve PCI ile ekstrakte edilmelidir.

8. RNA saklama Düşük sıcaklıkta saklansa bile eser miktarda RNaz RNA bozulmasına neden olur.RNA'nın uzun süreli korunması için en iyi çözüm bir tuz/alkol süspansiyonudur, çünkü alkol düşük sıcaklıklarda tüm enzimatik aktiviteyi engeller.

9. Katyonlar (Ca, Mg) bu iyonları içerdiğinde, 80°C'de 5 dakika ısıtmak RNA'nın bölünmesine neden olur, bu nedenle RNA'nın ısıtılması gerekiyorsa koruma solüsyonunun bir kenetleme maddesi (1 mM Sodyum Sitrat, pH 6.4) içermesi gerekir.

10. Sonraki deneylerde kullanılan enzimler, RNaz ile kontamine olabilir.

RNA Ekstraksiyonu İçin 10 İpucu

1: RNase aktivitesini hızla önleyin.Numuneler, toplandıktan sonra hızla dondurulur ve liziz sırasında hızlı işlemle RNaz inaktive edilir.

2: Yüksek ribozim içeriğine sahip doku için uygun bir ekstraksiyon yöntemi seçin ve adipoz doku fenol içeren yöntemi kullanmak en iyisidir.

3: Tahmin kalitesi Northern gerektirir, cDNA kütüphanesi yapısı yüksek bütünlük gerektirir ve RT-PCR ve RPA (Ribonükleaz koruma testi) yüksek bütünlük gerektirmez.RT-PCR, yüksek saflık (enzim inhibitör kalıntıları) gerektirir.

4: Kapsamlı homojenleştirme, verimi artırmanın ve bozulmayı azaltmanın anahtarıdır.

5: RNA elektroforez tespitinin bütünlüğünü kontrol edin, 28S: 18S = 2:1 tam bir işarettir, 1:1 de çoğu deney için kabul edilebilir.

6: RT-PCR için DNA'nın çıkarılması, dizi analizi DNA'yı çıkarmak için Dnase I kullanmak en iyisidir.

7: Eksojen enzimlerin kontaminasyonunu azaltın - enzimler dışarıdan ithal edilemez.

8: Düşük konsantrasyonlu nükleik asit konsantre edilirken, birlikte çökeltme reaktifi eklenmelidir.Ancak yardımcı çökeltici içeren enzimleri ve DNA kontaminasyonunu önlemek için.

9: RNA'yı iyice çözün, gerekirse 65°C'de 5 dakika ısıtın.

uygun depolama yöntemi

-20C'de kısa süreli, -80C'de uzun süre saklanabilir.RNA verimlerini artırmanın ilk adımı, farklı numunelerin RNA içeriğinin büyük ölçüde değiştiğini anlamaktır.Karaciğer, pankreas, kalp gibi yüksek bolluk (2-4ug/mg), beyin, embriyo, böbrek, akciğer, timus, yumurtalık gibi orta bolluk (0.05-2ug/mg), mesane, kemik, yağ gibi düşük bolluk (<0.05ug/mg) mg).

1: RN'yi serbest bırakmak için hücreleri parçalayın - RNA salınmazsa, verim azalır.Elektrikli homojenleştirme, diğer homojenleştirme yöntemlerinden daha iyi çalışır, ancak sıvı nitrojen ezme, enzimatik sindirim (Lizozim/Litikaz) gibi başka yöntemlerle de kombine edilmesi gerekebilir.

2: Çıkarma yönteminin optimizasyonu.Fenol bazlı yöntemlerle ilgili en büyük problemler, eksik tabakalaşma ve kısmi RNA kaybıdır (süpernatan tamamen çıkarılamaz).Tamamlanmamış tabakalaşma, kullanılan lizat miktarını artırarak veya numune miktarını azaltarak çözülebilen yüksek nükleik asit ve protein içeriğinden kaynaklanır.Yağ dokusuna bir kloroform ekstraksiyonu aşaması eklendi.RNA kaybı, geri pompalama veya organik tabakanın çıkarılması ve ardından santrifüjleme ile azaltılabilir.Sütun santrifüjleme tabanlı yöntemlerdeki en büyük sorun fazla numunedir.

Klasik Ekstraksiyon İpuçları

1. Fenol saflaştırması: Eşit hacimde 1:1 Fenol/Kloroform ekleyin ve 1-2 dakika kuvvetlice karıştırın.2 dakika yüksek hızda santrifüjleyin.Süpernatantı (%80-90) dikkatlice çıkarın.Asla orta katmana geçmeyin.Fenol/Kloroform'a eşit hacimde reaksiyon solüsyonu eklenebilir ve süpernatan uzaklaştırılabilir.İki süpernatan, verimi artırmak için nükleik asit çökelmesi için birlikte karıştırılabilir.Karıştırırken çok nazik olmayın ve tüm süpernatanı çıkarmaya çalışmayın.

2. %70-80 etanol ile yıkama: Yıkama sırasında kalan tuzun yıkandığından emin olmak için nükleik asit askıya alınmalıdır.Aynı zamanda, etanol döküldükten hemen sonra yüksek hızda birkaç saniye santrifüjleyin ve ardından artık etanolü bir pipetle çıkarın.5-10 dakika oda sıcaklığında beklettikten sonra eritin.

11. Özel kuruluşların çıkarılması

1. Lifli doku: Kalp/iskelet kası gibi lifli dokudan RNA ekstraksiyonunun anahtarı, dokuyu tamamen bozmaktır.Bu dokular düşük hücre yoğunluğuna sahiptir, bu nedenle dokunun birim ağırlığı başına düşen RNA miktarı düşüktür ve mümkün olduğu kadar çok başlangıç ​​​​miktarı kullanmak en iyisidir.Dokuyu donma koşulları altında iyice öğüttüğünüzden emin olun.

2. Yüksek protein/yağ içeriğine sahip dokular: beyin/bitkisel yağ içeriği yüksektir.PCI ekstraksiyonundan sonra, süpernatan beyaz topakları içerir.Süpernatan kloroform ile yeniden ekstrakte edilmelidir.

3. Yüksek nükleik asit/ribozim içeriğine sahip dokular: dalak/timus, yüksek nükleik asit ve ribozim içeriğine sahiptir.Dokunun donma koşulları altında öğütülmesi ve ardından hızlı homojenleştirme, ribozimleri etkili bir şekilde etkisiz hale getirebilir.Ancak lizat çok viskozsa (yüksek nükleik asit içeriğinden dolayı), PCI ekstraksiyonu etkili bir şekilde katmanlaşamayacaktır;daha fazla lizat eklemek bu sorunu çözebilir.Birden fazla PCI ekstraksiyonu, daha fazla artık DNA'yı kaldırabilir.Alkol eklendikten hemen sonra beyaz bir çökelti oluşursa, bu DNA kontaminasyonunu gösterir.Çözünmeden sonra asidik PCI ile yeniden ekstraksiyon, DNA kontaminasyonunu giderebilir.

4. Bitki dokusu: Bitki dokusu, hayvan dokusundan daha karmaşıktır.Genellikle bitkiler sıvı nitrojen koşulları altında öğütülür, bu nedenle endojen enzimler tarafından RNA bozulması nadirdir.Bozunma sorunu çözülmezse, bunun nedeni neredeyse kesin olarak numunenin içerdiği safsızlıklardır.Pek çok bitkide bulunan safsızlıklar kalıntılara yol açacaktır ve kalıntıların nedeni genellikle bu safsızlıkların RNA ile bazı benzerliklere sahip olmasıdır: siz çökelirsiniz ve ben çökelirim ve siz adsorbe ederim ve ben adsorbe ederim.Bu özellikler onların çok güçlü enzim inhibitörleri olduklarını belirler.

Şu anda, ticari RNA ekstraksiyon reaktifleri, küçük ayarlamalarla hemen hemen tüm hayvan dokularına uyarlanabilir, ancak çoğu bitki dokusu için uygun olabilecek birkaç ticari RNA ekstraksiyon reaktifi vardır.Neyse ki, Foregene özel sağlayabilirbitki RNA ekstraksiyon kitleri, sahibizBitki Toplam RNA İzolasyon kiti, Bitki Toplam RNA İzolasyon kiti Plus.İkincisi, yüksek polisakkarit ve polifenol içeriğine sahip bitkiler için özel olarak tasarlanmıştır.RNA ekstraksiyonu için laboratuvar kullanıcılarından gelen geri bildirimler özellikle iyidir.

12. Numune dondurma ve çözmenin etkisi Dondurulmuş numune daha büyük olabilir ve RNA ekstraksiyonu için kullanılmadan önce kesilmesi gerekir.Numuneler, kesme sırasında (muhtemelen kısmen) erime eğilimindedir.Dondurulmuş numunelerin RNA ekstraksiyonundan önce tartılması gerekebilir ve bu işlem sırasında mutlaka çözülme meydana gelecektir.Bazen numunenin çözülmesi, sıvı nitrojen öğütme işlemi sırasında da meydana gelir;veya donmuş numune, sıvı nitrojenle öğütülmeden doğrudan lizata eklenir ve tam homojenizasyondan önce çözülme kesinlikle gerçekleşir.Deneyler, donmuş dokunun, çözme sırasında taze dokuya göre RNA bozulmasına daha yatkın olduğunu göstermiştir.Muhtemel sebep: Donma-çözülme süreci, hücre içindeki yapıları bozarak endojen enzimlerin RNA ile doğrudan temasa geçmesini kolaylaştırır.

13. RNA kalitesinin yargılanması Genellikle elektroforez, RNA'nın bütünlüğünü yargılamak için kullanılır ve A260/A280, RNA'nın saflığını yargılamak için kullanılır.Teorik olarak bozulmamış RNA'nın oranı 28S:18S = 2.7:1'dir ve çoğu veri 28S:18S = 2:1 oranını vurgular.Gerçek şu ki, hücreler dışındaki numunelerden ekstrakte edilen RNA'nın neredeyse hiçbiri 2:1 oranında değildir (bu, Agilent Bioanalyzer kullanılarak elde edilmiştir).

RNA'nın elektroforez sonuçları, ikincil yapı, elektroforez koşulları, numune yükü, EB ile doygunluk derecesi, vb. dahil olmak üzere birçok faktörden etkilenir. RNA'yı saptamak için doğal elektroforezi kullanın ve kontrol olarak DNA Marker'ı kullanın.2kb'de 28S ve 0,9kb'de 18S netse ve 28S: 18S > 1 ise, bütünlük sonraki deneylerin çoğunun gereksinimlerini karşılayabilir.

A260/A280, çok fazla kafa karışıklığına neden olan bir göstergedir.Her şeyden önce, nükleik asitler için bu göstergenin orijinal anlamını açıklığa kavuşturmak gerekir: saf RNA, A260/280 = yaklaşık 2.0.Saf RNA 'neden' ve A260/A280 = 2 'etki'.Artık herkes A260/A280'i 'sebep' olarak kullanıyor, “A260/A280 = 2 ise RNA saftır” diye düşünüyor ki bu da doğal olarak kafa karışıklığına yol açıyor.

İlgileniyorsanız, RNA örneğinize fenol, guanidin izotiyosiyanat, PEG vb. Ekstraksiyonda sıklıkla kullanılan küçük bir reaktif ekleyebilir ve ardından A260/A280 oranını ölçebilirsiniz.Gerçek şu ki, RNA ekstraksiyonu için kullanılan reaktiflerin çoğunun yanı sıra numunedeki birçok safsızlık A260/A280'i etkileyerek A260 ve A280 civarında emer.

Şu anda en öğretici yaklaşım, 200-300 nm aralığındaki RNA örneklerini taramaktır.Saf RNA'nın eğrisi aşağıdaki özelliklere sahiptir: eğri pürüzsüzdür, A230 ve A260 iki bükülme noktasıdır, A300 0'a yakındır, A260/A280 = yaklaşık 2,0 ve A260/A230 = yaklaşık 2,0'dır.Tarama verileri mevcut değilse A260/A230 oranı da belirlenmelidir, çünkü bu oran enzimatik reaksiyonu etkileyen tüm safsızlıkların taşınmasına karşı daha hassastır.Cihazın doğrusal aralığını dikkate alın (A260 için 0,1–0,5).

Yararlı iki olgu daha vardır: A260/A280 suda ölçüldüğünde oran yaklaşık 0,3 daha düşük olacaktır;10 mM EDTA'da ölçülen oran ise 1 mM EDTA'da ölçülenden yaklaşık 0,2 daha yüksektir.

İlgili ürünler:

Çin Bitki Toplam RNA İzolasyon Kiti Üreticisi ve Tedarikçisi |Foregene (foreivd.com)

RNA izolasyon serisi Tedarikçiler ve Fabrika |Çin RNA izolasyon serisi Üreticileri (foreivd.com)

RNA izolasyon serisi – Foregene Co., Ltd. (foreivd.com)