• Facebook
  • Linkedin
  • Youtube
sayfa_banner

Gerçek Zamanlı PCR Easyᵀᴹ-Taqman

Takım Açıklaması:

Basit—Deneysel hatayı ve çalışma süresini azaltmak için 2× PCR Karışımı

Spesifik—optimize edilmiş tampon ve sıcak başlatmalı Taq enzimi, spesifik olmayan amplifikasyonu ve primer dimer oluşumunu önleyebilir

Yüksek hassasiyet—şablonun düşük kopyalarını algılayabilir

İyi çok yönlülük—çoğu gerçek zamanlı kantitatif PCR cihazıyla uyumludur

foregene gücü


Ürün ayrıntısı

Ürün etiketleri

SSS

Kit Açıklamaları

2X Gerçek PCR KolaylığıTMReal Time PCR Easy tarafından sağlanan Mix-TaqmanTM-Taqman kiti, Real Time PCR amplifikasyon reaksiyonları için spesifik floresan problar kullanan ve ürün özgüllüğünü ve reaksiyon hassasiyetini büyük ölçüde artırabilen yeni bir premiks sistemidir.ROX dahili kontrol boyası olarak sağlanır.

2X Gerçek PCR KolayTMMix-Taqman, Foregene'nin benzersiz sıcak başlangıçlı Taq DNA Polimerazını içerir.Sıradan Taq enzimleriyle karşılaştırıldığında, yüksek amplifikasyon verimliliği, güçlü spesifik amplifikasyon yeteneği ve düşük uyumsuzluk oranı gibi avantajlara sahiptir.Spesifik olmayan amplifikasyonu azaltabilir ve PCR'nin doğruluğunu artırabilir.

Özellikler

Gerçek Zamanlı PCR KolayTM-takman

Kit bileşimi (20μl sistem)

QP-01021

QP-01022

QP-01023

QP-01024

200T

500 ton

1000 ton

2000T

gerçek PCRKolayTMKarışım-takman

1 ml ×2

1.7 ml ×3

1.7 ml ×6

1.7 ml ×12

20×ROX Referans Boyası

200 ul

0,5ml

1 ml

1 ml × 2

DNazsız ddH2O

1.7 ml

1.7 ml ×2

10 mi

20 mi

Italimat

1

1

1

1

Özellikler ve avantajlar

■ Basit—Deneysel hatayı ve çalışma süresini azaltmak için 2X PCR Karışımı

■ Spesifik—optimize edilmiş tampon ve sıcak başlatmalı Taq enzimi, spesifik olmayan amplifikasyonu ve primer dimer oluşumunu önleyebilir

■ Yüksek hassasiyet—şablonun düşük kopyalarını algılayabilir

■ İyi çok yönlülük—çoğu gerçek zamanlı kantitatif PCR cihazıyla uyumludur

Kit uygulaması

qPCR analizi

iş akışı

RT PCR-Taqman
RT PCR-Taqman grafiği

grafik

Depolama ve raf ömrü

Bu kit ışıktan uzakta saklanmalı ve -20°C'de saklanmalıdır.Sık kullanılırsa, kısa bir süre (10 gün) için 4°C'de de saklanabilir.


  • Öncesi:
  • Sonraki:

  • Amplifikasyon sinyali yok

    1.Kitteki Taq DNA Polimeraz, kitin yanlış saklanması veya son kullanma tarihinin geçmesi nedeniyle aktivitesini kaybeder.
    Öneri: Kitin saklama koşullarını onaylayın;PCR sistemine yeniden uygun miktarda Taq DNA Polimeraz ekleyin veya ilgili deneyler için yeni bir Real Time PCR Kiti satın alın.

    2. DNA şablonunda çok sayıda Taq DNA Polimeraz inhibitörü vardır.
    Öneri: Şablonu yeniden saflaştırın veya kullanılan şablon miktarını azaltın.

    3.Mg2+ konsantrasyonu uygun değil.
    Öneri: Sağladığımız 2× Real PCR Mix'in Mg2+ konsantrasyonu 3,5 mM'dir.Ancak bazı özel primerler ve şablonlar için Mg2+ konsantrasyonu daha yüksek olabilir.Bu nedenle, Mg2+ konsantrasyonunu optimize etmek için doğrudan MgCl2 ekleyebilirsiniz.Optimizasyon için her seferinde Mg2+ 0,5 mM'nin artırılması önerilir.

    4. PCR amplifikasyon koşulları uygun değil ve primer dizisi veya konsantrasyonu uygun değil.
    Öneri: primer dizisinin doğruluğunu ve primerin bozulmadığını onaylayın;amplifikasyon sinyali iyi değilse tavlama sıcaklığını düşürmeye çalışın ve primer konsantrasyonunu uygun şekilde ayarlayın.

    5. Kalıp miktarı çok az veya çok fazla.
    Öneri: Şablon doğrusallaştırma gradyan seyreltmesi gerçekleştirin ve Real Time PCR deneyi için en iyi PCR etkisine sahip şablon konsantrasyonunu seçin.

    NTC'nin çok yüksek floresan değeri var

    1. Çalışma sırasında oluşan reaktif kontaminasyonu.
    Öneri: Real Time PCR deneyleri için yeni reaktiflerle değiştirin.

    2.PCR reaksiyon sisteminin hazırlanması sırasında kontaminasyon meydana geldi.
    Öneri: Çalıştırma sırasında gerekli koruyucu önlemleri alın, örneğin: lateks eldiven giymek, filtreli bir pipet ucu kullanmak, vb.

    3. Primerler bozulur ve primerlerin bozunması spesifik olmayan amplifikasyona neden olur.
    Öneri: Primerlerin bozulup bozulmadığını saptamak için SDS-PAGE elektroforezi kullanın ve Real Time PCR deneyleri için bunları yeni primerlerle değiştirin.

    Primer dimer veya spesifik olmayan amplifikasyon

    1.Mg2+ konsantrasyonu uygun değil.
    Öneri: Sağladığımız 2× Real PCR EasyTM Mix'in Mg2+ konsantrasyonu 3,5 mM'dir.Ancak bazı özel primerler ve şablonlar için Mg2+ konsantrasyonu daha yüksek olabilir.Bu nedenle, Mg2+ konsantrasyonunu optimize etmek için doğrudan MgCl2 ekleyebilirsiniz.Optimizasyon için her seferinde Mg2+ 0,5 mM'nin artırılması önerilir.

    2. PCR tavlama sıcaklığı çok düşük.
    Öneri: PCR tavlama sıcaklığını her seferinde 1°C veya 2°C artırın.

    3. PCR ürünü çok uzun.
    Öneri: Real Time PCR ürününün uzunluğu 100-150bp arasında olmalı, 500bp'den fazla olmamalıdır.

    4. Primerler bozulur ve primerlerin bozunması spesifik amplifikasyonun ortaya çıkmasına neden olur.
    Öneri: Primerlerin bozulup bozulmadığını saptamak için SDS-PAGE elektroforezi kullanın ve Real Time PCR deneyleri için bunları yeni primerlerle değiştirin.

    5.PCR sistemi uygun değil veya sistem çok küçük.
    Öneri: PCR reaksiyon sisteminin çok küçük olması tespit doğruluğunun azalmasına neden olacaktır.Real Time PCR deneyini yeniden çalıştırmak için kantitatif PCR cihazı tarafından önerilen reaksiyon sistemini kullanmak en iyisidir.

    Kantitatif değerlerin zayıf tekrarlanabilirliği

    1. Cihaz arızalı.
    Öneri: Aletin her bir PCR deliği arasında hatalar olabilir, bu da sıcaklık yönetimi veya algılama sırasında zayıf tekrar üretilebilirliğe yol açar.Lütfen ilgili cihazın talimatlarına göre kontrol edin.

    2. Numune saflığı iyi değil.
    Öneri: Saf olmayan numuneler, şablonun ve primerlerin saflığını içeren deneyin zayıf tekrarlanabilirliğine yol açacaktır.Şablonu yeniden saflaştırmak en iyisidir ve primerler en iyi şekilde SDS-PAGE ile saflaştırılır.

    3.PCR sistemi hazırlama ve saklama süresi çok uzun.
    Öneri: Real Time PCR sistemini PCR deneyi için hazırladıktan hemen sonra kullanın ve çok uzun süre kenarda bırakmayın.

    4. PCR amplifikasyon koşulları uygun değil ve primer dizisi veya konsantrasyonu uygun değil.
    Öneri: primer dizisinin doğruluğunu ve primerin bozulmadığını onaylayın;amplifikasyon sinyali iyi değilse tavlama sıcaklığını düşürmeye çalışın ve primer konsantrasyonunu uygun şekilde ayarlayın.

    5.PCR sistemi uygun değil veya sistem çok küçük.
    Öneri: PCR reaksiyon sisteminin çok küçük olması tespit doğruluğunun azalmasına neden olacaktır.Real Time PCR deneyini yeniden çalıştırmak için kantitatif PCR cihazı tarafından önerilen reaksiyon sistemini kullanmak en iyisidir.

    Mesajınızı buraya yazın ve bize gönderin.