Lnc-RT Heroᵀᴹ I(gDNase ile)(lncRNA'dan birinci sarmal cDNA sentezi için Süper Premiks)
Özellikler
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNase ile), genomik DNA kontaminasyonunu hızlı bir şekilde ortadan kaldırmak için lncRNA için özel olarak geliştirilmiş bir ters transkripsiyon sistemidir.5×gDNase Mix, RNA'da kalan genomu 42°C'de 2 dakika boyunca hızlı bir şekilde çıkarabilir ve genomun qPCR sonuçları üzerindeki girişimini etkili bir şekilde önleyebilir.
5×L-RT HeroTM Mix, özellikle lncRNA ve diğer uzun RNA kompleks şablonları için daha güçlü RNA afinitesi ve daha yüksek ters kayıt verimliliği ile yeni bir ters transkriptaz türü olan Foregene tarafından özel olarak geliştirilmiş Foregene LncRNA Ters Transkriptazı içerir.Optimize edilmiş sistem, ters transkripsiyon oranını daha hızlı hale getirir ve yüksek GC içeriği ve karmaşık ikincil yapıya sahip RNA şablonlarını kolayca kopyalayabilir.Birinci sarmal cDNA sentezi 42°C'de 15 dakikada tamamlanabilir.
Kit bileşenleri
| 5× gDnaz Karışımı |
| 5× L-RT Hero™ Karışımı |
| RNaz İçermeyen ddH2O |
| Talimatlar |
Özellikler ve avantajlar
■Şablondaki gDNA'yı 2 dakika içinde kaldırabilen gDNA'yı etkili bir şekilde kaldırma yeteneği.
■ LncRNA'nın transkripsiyonunu verimli bir şekilde tersine çevirebilir.Ters transkripsiyon ürünü qPCR'ye tabi tutulduğunda, Ct değeri geleneksel ters transkripsiyon sistemine göre daha düşüktür.
■ Etkili ters transkripsiyon sistemi, ilk sarmal cDNA'nın sentezinin tamamlanması yalnızca 15 dakika sürer.
■ Karmaşık şablonlar: yüksek GC içeriğine ve karmaşık ikincil yapıya sahip şablonlar da yüksek verimlilikle tersine çevrilebilir.
■ Yüksek hassasiyetli ters transkripsiyon sistemi, pg düzeyindeki şablonlar da yüksek kaliteli cDNA alabilir.
■ Ters transkripsiyon sistemi yüksek termal kararlılığa sahiptir, optimum reaksiyon sıcaklığı 42°C'dir.℃50'de hala iyi bir ters transkripsiyon performansına sahiptir.℃.
Kit uygulaması
lncRNA nispi kantitatif analizi.
lncRNA mutlak kantitatif analizi.
RNA virüsü gibi iz RNA'yı hızlı ve doğru bir şekilde analiz edebilir.
Yüksek GC içeriğine veya karmaşık ikincil yapıya sahip RNA şablonlarının ters transkripsiyonu.
iş akışı
Depolama ve Raf ömrü
Kit -20'de saklanmalıdır°C. Ürünü -20°C'de sabit sıcaklıktaki bir buzdolabında saklayın.°C alındıktan hemen sonra.Saklama koşulları uygunsa ürün 1 yıllık geçerlilik süresi boyunca performansını düşürmez.
Problem Analizi Rehberi
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-spesifik amplifikasyon
1. Mantıksız astar tasarımı
Öneri: Astarları, astar tasarım ilkelerine göre tasarlayın.
2. Genom kalıntıları.
Öneri: gDNA çıkarma reaksiyon sıcaklığının ilk adımının 42°C olduğundan emin olun ve reaksiyon süresi de 5 dakikaya kadar uzatılabilir.
RT-qPCR ile amplifikasyon sinyali yok
1. RNA bozulur.
Öneri: RNA ekstraksiyonu için materyal mümkün olduğu kadar taze olmalı ve yüksek kaliteli ve yüksek saflıkta RNA kullanılmalıdır.
2. RNA, inhibitörler içerir.
Öneri: Ters transkripsiyon inhibitörleri genellikle SDS, guanidin tuzları, EDTA vb. içerir. İnhibitörleri uzaklaştırmak için RNA çökeltisinin %70 etanol ile yıkanması önerilir.
3. Primer tasarım sorunları.
Öneri: Primer tasarım ilkesine göre, primerleri inceleme için yeniden tasarlayın.
Hedef bant, boş kontrolde görünür
1. Çalıştırma araçlarının veya reaktiflerin kontaminasyonu.
Öneri: Deney için tüm reaktifler veya ekipman otoklavlanmalıdır.DNA örneklerinin pipete emilmesini veya santrifüj tüpünden dışarı dökülmesini önlemek için kullanırken dikkatli ve nazik olun.
2. PCR reaksiyon sisteminin hazırlanması sırasında kontaminasyon meydana geldi.
Öneri: Kullanırken gerekli önlemleri alın, örneğin: lateks eldiven giymek, filtre uçlarını kullanmak.Kontaminasyona dayanıklı bir sistemde Real Time PCR Mix kullanın.
3. Primerler bozulmuştur.
Öneri: Primerlerin bozulup bozulmadığını saptamak için SDS-PAGE elektroforezini kullanın ve flüoresan algılama deneyleri için yeni primerlerle değiştirin.
Kullanım klavuzu:
