QuickEasyᵀᴹ Gerçek Zamanlı PCR Kiti-Taqman
Açıklamalar
2× QuickEasyTMQuickEasy tarafından sağlanan Real PCR Mix-TaqmanTMReal Time PCR Kit-Taqman kiti, spesifik floresan problar kullanılarak Real Time PCR amplifikasyon reaksiyonu için tasarlanmış yeni nesil bir master mix sistemidir.Çekirdek Foregene HS Taq DNA Polimeraz, Foregene daha fazla optimize edilmiş PCR sistemi ile birlikte kullanılan Antikor modifikasyonuna dayalıdır ve daha yüksek özgüllüğe ve amplifikasyon verimliliğine sahiptir.Sıradan PCR karışımı ile karşılaştırıldığında, daha güçlü amplifikasyon kabiliyetine ve daha düşük uyumsuzluk oranına sahiptir.Spesifik olmayan amplifikasyonu azaltmak ve PCR'nin doğruluğunu artırmak için floresan kantitatif PCR reaksiyonunda kullanılabilir.Ürün özgüllüğünü ve reaksiyon hassasiyetini büyük ölçüde artırabilir.Aynı zamanda, dahili bir referans boya olarak ROX sağlandı.
Hızlı KolayTMReal Time PCR Kit-Taqman kiti, şablon miktarına ilişkin geniş bir uygulama kapsamına sahiptir ve farklı kantitatif bölgelerde iyi bir standart eğri elde edebilir ve iyi tekrarlanabilirlik ve yüksek güvenilirlik ile hedef genleri doğru bir şekilde ölçebilir ve saptayabilir.
Özellikler
200 Hazırlık,500 Hazırlık,1000 Hazırlık,2000 Hazırlıkları
Kit bileşenleri
Hızlı KolayTMReal Time PCR Kit-Taqman(20ulsistem) | ||||
Kit içeriği | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 Hazırlık | 500 Hazırlık | 1000 Hazırlık | 2000 Hazırlıkları | |
2×HızlıKolayTM gerçek PCR Karışım-takman | 1 mL×2 | 1,7 mL×3 | 1,7 mL×6 | 1,7 mL×12 |
20×ROX Referans Boyası | 200μL | 0,5 mL | 1 mL | 1 mL×2 |
DNazsız ddH2O | 1,7 mL | 1,7 mL×2 | 10 mL | 20 mL |
EĞER SEN | 1parça | 1parça | 1parça | 1parça |
Özellikler ve avantajlar
■ Eşsiz PCR optimizasyon sistemi, 2×QuickEasy'yiTMReal PCR Mix-Taqman daha uyumludur.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polimeraz daha yüksek amplifikasyon verimliliğine, daha yüksek amplifikasyon hassasiyetine ve daha yüksek amplifikasyon özgüllüğüne sahiptir.
■ 2× Hızlı KolayTM Real PCR Mix -Taqman, genotipleme ve kopya sayısı değişimi belirleme ve doğru sonuçlar elde etmek için kullanılabilen sekansa özgü prob tespitinin hassasiyetini ve özgüllüğünü geliştirmek için Foregene tarafından optimize edilmiş benzersiz bir sistem kullanır.
■ Bu ürün, kuyucuklar arasındaki sinyal arka planını ve sinyal hatasını ortadan kaldırmak için kullanılabilen ROX dahili referans boyası ile birlikte gelir, bu da müşterilerin farklı kantitatif PCR aletleri türlerinde kullanmasına uygundur.
Kit uygulaması
■ Şablon kantitatif analizi için floresan kantitatif PCR;
■ Cgeleneksel PCR amplifikasyonu;
■ Alel tespiti için kullanılabilir.
Depolama ve Raf ömrü
Kit karanlıkta -20°C'de saklanmalıdır;sık kullanılıyorsa 4°C'de kısa süre de saklanabilir (10 gün içinde tükenir).
Real Time PCR primer tasarım ilkeleri
İleri Astar ve Ters Astar
Real Time PCR için primer tasarımı çok önemlidir.Primerler, PCR amplifikasyonunun özgüllüğü ve etkinliği ile ilgilidir ve aşağıdaki ilkelere göre tasarlanabilir:
Astar uzunluğu: 18-30bp.
GC içeriği: %40-60.
Tm değeri: Primer 5 gibi primer tasarım yazılımları primerin Tm değerini verebilir.Yukarı ve aşağı primerlerin Tm değerleri mümkün olduğu kadar yakın olmalıdır.Tm hesaplama formülü de kullanılabilir: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR yapılırken, genellikle 5 °C'lik primer Tm değerinin altındaki bir sıcaklık, tavlama sıcaklığı olarak seçilir (tavlama sıcaklığındaki karşılık gelen artış, PCR reaksiyonunun özgüllüğünü artırabilir).
Primerler ve PCR ürünleri:
Tasarım primeri PCR amplifikasyon ürünü uzunluğu tercihen 100-150bp'dir.
Şablonun ikincil yapısal alanındaki tasarım astarlarından mümkün olduğunca kaçınılmalıdır.
Yukarı ve aşağı primerlerin 3' uçları arasında 2 veya daha fazla tamamlayıcı baz oluşumundan kaçının.
Primer 3' terminal tabanı, ardışık 3 ek G veya C ile mevcut olamaz.
Primerlerin kendileri tamamlayıcı yapılara sahip olamazlar, aksi takdirde PCR amplifikasyonunu etkileyen saç tokası bir yapı oluşacaktır.
ATCG, primer sekansında mümkün olduğu kadar eşit dağıtılmalı ve T olarak 3' terminal tabanından kaçınılmalıdır.
Ek 1:Cell Direct RT-qPCR Kit bileşen ek paketi
1.Hücre Parçalama Çözümü
| |||
Kit bileşenleri (24 kuyulu lizis sistemi / kuyu) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ton | 500 ton | ||
ParçaBEN | Tampon CL | 20 mi | 100 mi |
Foregene Proteaz Plus II | 400 ul | 1 ml × 2 | |
Tampon ST | 1 ml × 2 | 10 mi | |
ParçaIII | DNA Silgisi | 400 ul | 1 ml × 2 |
2.RT Karışımı
| |
Kit bileşenleri (20 ul reaksiyon sistemi) | DRT-01011-B1 |
200 ton | |
5× Doğrudan RT Karışımı | 800 ul |
RNaz İçermeyen ddH2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Kit bileşenleri (20 ul reaksiyon sistemi) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 ton | 1000 ton | |
2× Doğrudan qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50× ROX Referans Boyası | 40 ul | 200 ul |
RNaz İçermeyen ddH2O | 1.7 ml | 10 mi |