ForeDirect RT-qPCR Kiti
Tanım
ForeDirect RT-qPCR Kiti, RNA saflaştırma işlemleri olmadan swab koleksiyonlarından doğrudan gerçek zamanlı RNA amplifikasyonu için tasarlanmıştır.Bu kit, qRT-PCR döngülerini bir saat içinde tamamlar.Enzim karışımı, Ters Transkriptaz, Hot-Start Taq DNA polimeraz, RNaz inhibitörünün optimize edilmiş bir karışımıdır.Reaksiyon Tamponu, optimize edilmiş tampon bileşenleri, Mg dahil gerekli tüm bileşenleri içerir.2+, dUTP ve dNTP'ler.
Özellikler
100 ton
Kit bileşenleri
Nükleik asit salma maddesi |
RNA koruyucu |
2× RT-qPCR Tamponu |
Enzim Karışımı(Taq&M-MLV) |
Talimatlar |
PCR Uygulaması
1. PCR reaksiyon tüpleri kısa bir süre santrifüjlendikten sonra bunları amplifikasyon aletinin numune tankına yerleştirin.
2. Termal protokol
Adım | Sıcaklık | Zaman | Döngüler | |
1 | Ters transkripsiyon | 50°C | 15 dakika | 1 |
2 | ön denatürasyon | 95°C | 1 dakika | 1 |
3 | denatürasyon | 95°C | 10 saniye | 42 |
4 | Tavlama/Uzatma | 60°C | 30 saniye |
Not:Floresan sinyali, her döngünün uzatma adımından hemen sonra tespit edildi.
3. Ayarladıktan sonra dosyayı kaydedin ve reaksiyon programını çalıştırın.
Çalıştırma Adımları
Reaktif hazırlamadan önce kit içindeki tüm reaktifler oda sıcaklığında çözülmeli ve hafifçe karıştırılmalıdır.
reaktif hazırlama
1. Nükleik Asit Salma Karışımını Hazırlayın
Bileşen | Numune veya Kontrol Başına Hacim |
Nükleik asit salma maddesi | 5μL |
RNA koruyucu | 0,5 uL |
2. Reaksiyon Karışımını Hazırlayın
Bileşen | Numune veya Kontrol Başına Hacim |
2× RT-qPCR Tamponu | 15 uL |
Enzim Karışımı(Taq&M-MLV) | 1,5 uL |
Primerler ve Problar | 1μL |
Depolama ve Raf ömrü
-Kit -20 derecede saklanmalıdır.± 5℃.Geçerlilik süresi 12 aydır.
-Tekrarlanan donma-çözülme döngülerinden kaçının (<5 döngü).