Doğrudan RT-qPCR Kiti
Takım Açıklaması:
◮ Benzersiz reaksiyon tamponu ile Foregene tarafından geliştirilen Foreasy Reverse Transkriptaz ve Foreasy HS Taq DNA Polimeraz kullanan Direct RT-qPCR Kiti, bu kiti güçlü direnç ve uyumlulukla yapar ve Foregene Lysis sistemini şablon olarak kullanan reaksiyonu doğrudan test edebilir.Bu kit, COVID-19 nükleik asit tespit kiti ve diğer patojenik bakteri nükleik asit tespit kiti geliştirme için geçerli olabilir.
Tanım
Direct RT-qPCR Kiti, ayrı paketlenmiş RT-qPCR tamponu ve yüksek verimli enzim sağlarkarışım(Taq、M-MLV、RI)，bunu arka uç kitleri ve sistem oluşturmak için uygun hale getirirayarlama, basit doğrulama içinde.
Özellikler
500T, 50.000T
Kit bileşenleri
| Kit içeriği (20 μL reaksiyon sistemi) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 ton | 50.000 ton | |
| Direkt Enzim Karışımı | 500 uL×1 | 50 mL×1 |
| 2× Doğrudan RT-qPCR Tamponu | 1 mL×5 | 500ml×1 |
| Talimat | 1 | 1 |
Çalıştırma Adımları
Reaktif hazırlamadan önce kit içindeki tüm reaktifler oda sıcaklığında çözülmeli ve hafifçe karıştırılmalıdır.
A: Hazırlanmak of şablon Ve ayıraç
1. Hazırlanan RNA şablonunu (RNA şablonunu ekstrakte etmek ve saflaştırmak için Foregene Total RNA Isolation Kit serisi kitinin kullanılması önerilir) veya örnek parçalama ürünü (Foregene Lysis sistemi kullanılması önerilir), spesifik primerler (10 μM) ve diğer ilgili sarf malzemeleri, alet hazırlayın.
2. 2× Doğrudan RT-qPCR Tamponu, RNaz İçermeyen ddH2O ve 20× ROX Referans Boyası koyun (eğer's) buzla birlikte kutuya koyun, bunların doğal olarak erimesini sağlayın ve nazikçe karıştırın.
B: Hazırlanmak of RT-qPCR sistem
Masa 1 : Hazırlanmak of RT-qPCR ssistem
| Bileşen | Hacim | Nihai konsantrasyon |
| 2× Doğrudan RT-qPCR Tamponu | 10 uL | 1× |
| Direkt Enzim Karışımı | 1μL | |
| İleri Primer(10 μM) | 0,8 uL | 50-900nM |
| Ters Astar(10 uM) | 0,8 uL | 50-900nM |
| Prob(4 uM) | 1μL | 200nM |
| Şablon(RNA veya Lizat) | X uL | |
| 20×ROX Referans Boyası | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Toplam ses | 20μL |
C: Ayarlamak the RT-qPCR reaksiyon programı
Masa 2 : RT-qPCR tepkion programı ayar (için örnek: iki-adım yöntem)
| Adım | Sıcaklık | Zaman | Döngüler | İçerik | |
| 1 | 50°C | 15 dakika | 1* | 1 | Ters transkripsiyon |
| 2 | 95°C | 1 dakika | 1 | ön denatürasyon | |
| 3 | 95°C | 10 saniye | 40-45 | denatürasyon | |
| 60°C | 30 saniye 2* | Tavlama/Uzatma | |||
Depolama ve Raf ömrü
-Kit -20 derecede saklanmalıdır.± 5℃.Geçerlilik süresi 12 aydır.
-Tekrarlanan donma-çözülme döngülerinden kaçının (<5 döngü).
